虾加工副产物中活性肽提取工艺及功效研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lanbour156
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虾加工副产物富含蛋白资源,但多数未加以利用或仅用于加工成动物饲料等初级产品,缺乏对虾蛋白资源的高质化利用。针对这一问题,本研究首先以南美白对虾加工副产物为原料,采用酶解技术和膜分离技术,优选碱性蛋白酶协同内源酶酶解,建立水解高效的酶解工艺,获得具有抗氧化、免疫调节作用的特定分子量片段的虾活性肽。其次,采用喷雾干燥技术制备虾活性肽微胶囊,提高虾活性肽产品的稳定性。最后将虾活性肽微胶囊应用于复合可食膜的制备及对虾的保鲜,为高值化利用虾副产物资源提供参考。研究的主要内容及结论如下:1.南美白对虾副产物酶解工艺的优化。通过比较虾头内源酶自溶酶解与外源酶协同虾头内源酶自溶酶解对蛋白水解度的影响,经单因素试验和响应面试验优化酶解工艺。结果表明,利用虾头内源酶酶解提取虾活性肽,其最佳酶解工艺参数值为:酶解时间6h,酶解温度41.5℃,料液比1:6,p H 8.0,此条件下酶解,蛋白水解度达28.72%。采用碱性蛋白酶协同虾头内源酶自溶酶解提取虾活性肽,其最佳酶解工艺参数值为:酶添加量4%,酶解时间6.5 h,酶解温度40℃,料液比1:5,此条件下酶解,蛋白水解度达50.02%。2.虾活性肽的功效评价。采用膜分离技术,获得分子量分布在75~1355 Da占70%以上的虾活性肽。采用CCK-8法对虾活性肽进行细胞毒性评价;以羟自由基清除率、DPPH自由基清除率为指标,考察其抗氧化能力;利用免疫力低下小鼠模型,以免疫脏器指数、吞噬指数为指标,研究虾活性肽的免疫调节作用;最后将制备的虾活性肽添加到虾养殖饲料中,研究虾活性肽对斑节对虾的促生长作用。结果表明,虾活性肽对Hep G2、BEL7402细胞无毒性作用,其对羟自由基清除率IC50为4.64 mg/m L、DPPH自由基清除率IC50为3.08mg/m L,具有一定的抗氧化能力。并且虾活性肽中剂量组(10mg/kg)能显著促进淋巴细胞增殖,并提高免疫低下模型小鼠的免疫器官指数和吞噬指数,具有显著的免疫调节作用。此外,在虾养殖的饲料中添加10%的虾活性肽对斑节对虾的生长速度有明显的促进作用。3.虾活性肽微胶囊的制备。采用喷雾干燥技术制备虾活性肽微胶囊,以阿拉伯胶、β-环状糊精为壁材,在单因素试验的基础上,采用正交试验设计法优化虾活性肽微胶囊制备工艺,其最佳工艺参数为:壁材(阿拉伯胶与β-环状糊精)比3:1,芯壁比1:4,固形物含量15%。此条件下制备的虾活性肽微胶囊色泽呈淡黄色、无不良气味,粒径小于10μm的占90%以上,虾活性肽的平均包埋率为90.11%。扫描电镜观察可见,微胶囊表面连续且完整,无孔洞、开裂等现象。经傅立叶变换红外光谱仪扫描分析,初步确定虾活性肽微胶囊的形成。与未包埋的虾活性肽相比,微胶囊的吸湿性明显降低,提升了贮存稳定性。微胶囊经模拟胃肠液消化12 h的累计释放量为89.82%,显示具有较好的缓释性能。4.复合可食膜的制备及其保鲜作用研究。采用单因素试验优化虾活性肽微胶囊复合可食膜制备工艺,最佳膜组分为:羟丙甲基纤维素(HPMC)添加量12%,甘油添加量0.4%,微胶囊添加量3%,此条件下制备的可食膜,机械性能较好。探究虾活性肽微胶囊复合可食膜及涂膜液对南美白对虾的保鲜作用。结果显示,复合可食膜及涂膜液均对南美白对虾具有较好的保鲜效果,相较于对照组,可延长虾的贮藏期3~4 d。
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