发酵法生产α-熊果苷及其分离纯化

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α-熊果苷,一种高效、安全、配伍性强的天然美白活性物质。它比同分异构体β-熊果苷的美白效果更好、更安全。本论文探讨利用嗜麦芽黄单胞菌BT-112(Xanthomonas maltophilia BT-112)生物合成α-熊果苷,并对产物分离纯化进行了研究。利用嗜麦芽黄单胞菌BT-112催化合成α-熊果苷的方法具有原料简单,反应条件容易控制,反应周期短,产物纯度高等优点,具有重要的工业化意义。本论文系统地阐述了黄单胞菌的诱变筛选过程、发酵条件的优化及产物的分离纯化。通过对黄单胞菌的诱变筛选,最终获得了一株酶活高、专一性强、遗传性状稳定的菌株BT112;通过发酵条件的优化,确定了培养基的最佳配方为:蔗糖50g,蛋白胨10g,牛肉膏5g;培养的最佳条件:发酵培养基50ml于250ml三角瓶中,在30℃、180r·min/l摇床培养48h,加入反应物对苯二酚与蔗糖进行反应72小时;发酵液以大孔吸附树脂进行分离纯化,通过对多种树脂的选择,最终选择了一种吸附力强、柱效高、寿命长的树脂AB-8,分离纯化的最佳条件为:树脂吸附力为10g/100g树脂,上柱液浓度为10g/l,上柱流速为1BV/h,洗脱液浓度为30%酒精溶液,洗脱流速为1BV/h,洗脱液体积为3BV;洗脱液进行浓缩结晶,最终获得的产物纯度高达99%以上,整个工艺过程收率为85%以上。
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