【摘 要】
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①探讨Geneticin及其相关实验方法在离体纯化培养NF1患者神经纤维瘤雪旺细胞中的作用,获得纯净的雪旺细胞;②通过对NF1蛋白和hTERT蛋白表达水平的研究,探讨NF1患者神经纤维瘤
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①探讨Geneticin及其相关实验方法在离体纯化培养NF1患者神经纤维瘤雪旺细胞中的作用,获得纯净的雪旺细胞;②通过对NF1蛋白和hTERT蛋白表达水平的研究,探讨NF1患者神经纤维瘤发生、发展的分子病理机制;③通过E2和其受体拮抗剂对离体肿瘤细胞的干预,探讨E<,2>和E<,2>受体拮抗剂对神经纤维瘤的形成和发展的影响,分析其可能的细胞分子机制.结论:5.1 NF1患者神经纤维瘤中雪旺细胞纯化培养的实验研究5.1.1应用含有Geneticin的培养液培养NF1神经纤维瘤细胞,结合酶快速消化法和差数贴壁法,能够有效地去除成纤维细胞的沾染,获得纯度高、活力良好的雪旺细胞.5.1.2应用含有100ug/ml的Geneticin的培养液培养NF1神经纤维瘤细胞2~3天,既能有效地去除成纤维细胞,又不会影响雪旺细胞活力.5.2 NF1中神经纤维瘤发生机制及雌激素调控作用的研究5.2.1 NF1患者神经纤维瘤的形成除了与NF1蛋白表达缺失,肿瘤抑制作用减弱有关外还与hTERT蛋白表达增加,端粒酶活性增高有关;而非NF1患者神经纤维瘤的形成与hTERT蛋白表达增加,端粒酶活性增高有关,与NF1蛋白表达缺失无关.5.2.2 E<,2>能够促进NF1神经纤维瘤中雪旺细胞的增殖,其中生理浓度10-7mol/L的E<,2>作用24小时能明显增加雪旺细胞的增殖能力.5.2.3 E<,2>对NF1中神经纤维瘤形成的促进作用是通过提高hTERT蛋白表达,进而增加端粒酶活性促进细胞增殖这一通路,而非上调NF1蛋白表达.E<,2>这一作用可以被受体拮抗剂Tamoxifen抑制.
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