山西省猪源不动杆菌的耐药性检测与分析

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为了研究山西省猪源不动杆菌的耐药性,对2019年从山西省猪肺组织分离鉴定的30株不动杆菌进行了体外耐药试验、耐药基因检测及其基因表达分析,为不动杆菌耐药机制研究和指导临床合理使用抗菌药物提供依据。1.采用纸片扩散法(K-B)对30株不动杆菌进行了13种抗菌药物的体外耐药试验。结果:30株不动杆菌对苯唑西林耐药率最高为76.7%,其中A.baumannii对氨苄西林、哌拉西林、苯唑西林、头孢唑啉、复方新诺明、四环素、庆大霉素、克林霉素、环丙沙星、万古霉素10种抗菌药物均耐药;A.lwoffii对复方新诺明耐药率为50%;A.junii对苯唑西林耐药率为100%;A.ursingii对哌拉西林、苯唑西林、头孢唑啉、四环素耐药率均达到100%,对头孢他啶、复方新诺明、克林霉素耐药率为66.7%;A.towneri对苯唑西林的耐药率最高为84.6%,对头孢唑啉和复方新诺明的耐药率分别为46.2%和53.8%。结果说明:山西省猪源不动杆菌的耐药现象普遍,尤其鲍曼不动杆菌的多重耐药率极高,达到76.9%。2.用普通PCR方法检测了β-内酰胺类、四环素类、磺胺类耐药菌株的常见耐药基因以及外排泵基因。结果:β-内酰胺类耐药菌株中TEM基因检出率最高为65.2%,CTX-M1基因检出率为21.7%,Amp C基因检出率为17.4%,OXA-51基因检出率为17.4%,OXA-58基因检出率为4.4%,PER、SHV、IMP、VIM以及OXA-23、OXA-24基因均未检出;四环素类耐药菌株中tet A和tet B基因均未检出;磺胺类耐药菌株中sul-2基因检出率最高为75%,sul-1基因检出率为6.3%;30株不动杆菌外排泵基因检测中Mac B基因检出率最高为40%,ade J、abe M、abe S基因仅在鲍曼不动杆菌中检出,ade B和Cra A基因均未检出。结果说明:不动杆菌耐药菌株中检出耐药基因7种,以TEM和sul-2基因检出率较高,且与耐药表现基本一致;外排泵基因检出4种,以Mac B基因检出率较高。3.利用荧光定量PCR技术检测了氨苄西林、头孢唑啉和磺胺类药物耐药菌株的耐药基因表达。结果:不动杆菌耐药菌株在抗菌药物培养基中培养16 h时,各耐药基因表达效果较好。五个不同菌种间的耐药基因表达分析,在不同浓度氨苄西林培养基培养,A.baumannii、A.towneri均以Mac B基因为优势表达基因,A.lwoffii以sul-2基因为优势表达基因,A.junii以TEM基因为优势表达基因,A.ursingii未检测到优势表达基因;在不同浓度头孢唑啉培养基培养,五个菌种各耐药基因的表达均不一致;在不同浓度磺胺甲恶唑培养基培养,A.baumannii、A.towneri、A.lwoffii、A.junii均以sul-2基因为优势表达基因,A.ursingii未检测到优势表达基因。同一菌种不同地方菌株间的耐药基因表达分析,A.towneri中不同地方头孢唑啉耐药菌株,YZ23菌株以TEM基因为优势表达基因,LY2菌株没有检测到优势表达基因;A.lwoffii和A.towneri中不同地方的磺胺类药耐药菌株,均以sul-2基因为优势表达基因。同一菌种相同地方菌株间的耐药基因表达分析,A.towneri中相同地方的磺胺类药耐药菌株以sul-2基因为优势表达基因、头孢唑啉耐药菌株以TEM基因为优势表达基因。结果说明:不动杆菌不同菌种间磺胺类药耐药菌株均以sul-2基因为优势表达基因,不同地方同一菌种的头孢唑啉耐药菌株的优势表达基因有所差异,相同地方同一菌种的头孢唑啉耐药菌株的优势表达基因结果相似。
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