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组蛋白修饰不仅与染色体的重塑与功能状态紧密相关,而且在决定细胞命运、细胞生长以及致癌作用的过程中发挥着重要的作用。糖基转移酶OGT及糖苷酶OGA介导的糖基化修饰是翻译后修饰中重要的一种修饰方式,对参与细胞过程的多种蛋白具调控作用。研究表明,糖基化修饰与磷酸化修饰间存在广泛的联系且OGT的缺失可影响参与DNA损伤修复过程蛋白的磷酸化,但是OGT是否直接参与了 DNA损伤修复过程尚无定论。此外,最近研究表明OGT可糖基化修饰H2B的Ser112位点,并由此调控基因的转录,但此组蛋白修饰在DNA损伤修复过程中的作用尚不清楚。本实验对OGT及OGT调控的H2B S112GlcNAc在DNA修复应答中的作用及相关机制进行了研究。本研究通过DNA损伤试剂敏感性实验,发现在敲低内源OGT或过表达H2B S112A突变体后细胞对DNA损伤试剂的敏感性增强;通过免疫荧光实验,发现敲低内源OGT或过表达H2BS112A突变体后,DNA损伤修复进程受到影响;通过DNA损伤修复实验,发现敲低内源OGT或过表达H2BS112A突变体后,细胞的同源重组修复(HR)及非同源末端连接修复(NHEJ)受损;此外,通过染色质免疫共沉淀实验发现DNA损伤后H2B S112GlcNAc在损伤位点处明显增加。这些结果表明OGT及OGT调控的H2B S112GlcNAc参与DNA损伤修复应答。为探究其分子机制,本研究通过蛋白亲和纯化和质谱鉴定实验,发现了 H2B S112GlcNAc的一个重要的相互作用蛋白NBS1,并通过内源免疫共沉淀实验对两者相互作用进行了验证;通过免疫荧光实验,进一步发现H2B S112GlcNAc可调控NBS1在DNA损伤位点的招募。综上,本研究阐明OGT直接参与DNA损伤修复且OGT调控的H2B S112GlcNAc通过与NBS1相互作用并对其在DNA损伤位点的招募进行调控参与DNA损伤修复应答。