甘蔗对Pb的吸收累积、生理响应及耐性机制研究

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糖料甘蔗制糖业是广西支柱产业,广西糖料甘蔗种植面积和产量位居全国首位,而重金属污染是广西突出的环境问题之一,重金属在甘蔗体的吸收累积直接影响甘蔗品质,甘蔗制糖食品的安全引起高度关注。本研究以广西主栽的糖料甘蔗“台优”为试验材料,采用土培盆栽试验,研究不同浓度Pb胁迫下,甘蔗对Pb吸收累积特性及Pb对甘蔗生长的影响,并从光合荧光特性、抗氧化系统方面探明甘蔗对Pb生理响应机制,从细胞水平和分子水平揭示甘蔗对Pb耐性和解毒机理,为培育高耐性低累积的甘蔗品种提供理论基础,对于指导甘蔗在重金属污染农用地安全生产具有重要意义。取得的主要研究结果如下:
  (1)甘蔗属于Pb高耐受性植物,在各Pb胁迫浓度下能正常生长且未见明显表观毒害症状。甘蔗体内的Pb富集量为:根>叶>茎,甘蔗根系对Pb的累积显著高于其地上部分,Pb从甘蔗根系向茎和叶的转移能力较弱,甘蔗可食部分茎中Pb富集量最少。Pb对甘蔗生长有“低促高抑”作用,Pb胁迫浓度为250.0 mg/kg时可以促进甘蔗的生长,而Pb胁迫浓度为1250.0mg/kg及以上时则显著限制了甘蔗的生长。甘蔗根系对Pb的固定和截留,限制Pb向地上部分转移,减轻Pb对甘蔗的毒害,是甘蔗对Pb的耐性机制之一。
  (2)低浓度Pb胁迫促进光合作用,有利于甘蔗生长,高浓度Pb阻碍光合作用,抑制甘蔗生长。甘蔗光合速率的下降,主要受气孔开度的影响。在高浓度Pb的胁迫下,气孔关闭可能是甘蔗减少Pb进入体内的一种保护机制。甘蔗受到一定浓度Pb胁迫时,增加了非光化学猝灭,甘蔗通过增加热耗散来减轻Pb胁迫,使得Pb对其光合细胞的毒害减弱;但当Pb胁迫浓度大于1250.0 mg/kg时,抑制了光系统Ⅱ(PSⅡ)反应中心的潜在活性及PSⅡ和PSⅠ间的电子传递,导致电子传递过程受到阻碍,影响光合作用,抑制甘蔗生长。
  (3)甘蔗通过调节超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)的活性来提高其对Pb的防御性能。随着Pb胁迫浓度的升高,甘蔗根和叶中的SOD、CAT和POD活性先升高后降低。在Pb胁迫浓度为1250.0 mg/kg及以下时,甘蔗中的SOD、CAT和POD活性显著升高,有效消除Pb胁迫时产生的大量活性氧和H2O2,减少Pb对甘蔗抗氧化系统的伤害;而在Pb胁迫浓度为2500.0 mg/kg时,甘蔗中的SOD和CAT活性显著下降,不能消除逆境胁迫时产生的大量活性氧和H2O2,甘蔗明显受到氧化胁迫的毒害。
  (4)低浓度Pb胁迫促进甘蔗对K、Ca和Mg等大量元素和Cu、Fe、Zn和Mn等微量元素的吸收,而高浓度的Pb胁迫则抑制了甘蔗对这些矿物质的吸收。甘蔗在低浓度Pb胁迫时,可能通过提高细胞内K、Ca等矿物质元素阳离子浓度,缓解Pb对甘蔗的毒害,而在高浓度Pb胁迫时,Pb破坏甘蔗体内矿物质养分的动态平衡,引起甘蔗对矿物质养分吸收不足或不平衡,抑制甘蔗的生长。
  (5) Pb在甘蔗根和叶中的亚细胞分布为:细胞壁>细胞器>胞液,大部分Pb沉积在甘蔗根和叶的细胞壁中,甘蔗根和叶中的Pb化学提取形态主要以醋酸提取态和盐酸提取态为主。甘蔗通过Pb与细胞壁的结合以及将部分可溶态Pb转换成活性低的磷酸盐或草酸盐来减少Pb对自身的伤害,这是甘蔗主要的解毒和耐受机制之一。
  (6)甘蔗根中共有32238条差异表达基因,其中10544条差异基因表达上调,21694条差异基因表达下调;甘蔗叶片中共有6263条差异表达基因,其中2774条差异基因表达上调,3489条差异基因表达下调。通过对Pb胁迫下的甘蔗差异表达基因进行分析,发现甘蔗中有11种转运蛋白基因、17种硫代谢相关的基因及15种抗氧化酶基因过量表达,表明甘蔗在Pb胁迫下主要通过激活转运蛋白基因、抗氧化酶基因及硫代谢相关基因来进行防御和解毒。
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