【摘 要】
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目的:探讨临床相关剂量地塞米松(dexamethasone,DEX,人工合成糖皮质激素,GCs)对成年雄性子代血管功能的影响,并探讨IP3-Ca2+通路在其中的作用机制。方法:本实验以SD大鼠为研
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目的:探讨临床相关剂量地塞米松(dexamethasone,DEX,人工合成糖皮质激素,GCs)对成年雄性子代血管功能的影响,并探讨IP3-Ca2+通路在其中的作用机制。方法:本实验以SD大鼠为研究对象,将孕鼠随机分为对照组(vehicle normal saline,VEH)和地塞米松暴露组(DEX),每组各13只。每组各取5只孕鼠(孕21天)采用剖宫产术收集胎鼠肠系膜组织,对胎鼠组织采用RT-PCR和Western-blot技术进行相关分子生物学实验;每组各取8只孕鼠自然分娩获得20周龄发育正常子代成年雄鼠。分离子代大鼠肠系膜动脉采用血管张力检测系统研究两组肠系膜动脉血管环对苯肾上腺素(phenylephrine,PE)引起的收缩反应变化,分离血管平滑肌细胞进行电生理学实验,利用PKC通路抑制剂GF(GF109203X)、内质网钙ATP酶抑制剂TG(Thapsigargin)、内质网雷诺丁受体抑制剂RYR(Ryanodine)、内质网IP3受体抑制剂 2-APB(2-aminoethyldiphenylborinate)、L 型钙通道抑制剂 Nifedipine、L型钙通道激动剂Bayk8644等药物,探讨血管收缩功能障碍有关通路的改变,从细胞电生理水平上深入研究相关分子机制。采用RT-PCR和Western-blot技术检测子代肠系膜动脉组织相关基因和蛋白表达水平。结果:DEX组子代肠系膜动脉血管对苯肾上腺素(phenylephrine,PE)介导的血管收缩反应明显强于对照组;在两组子代肠系膜动脉血管中,GF、TG、RYR均部分抑制了 PE引起的血管收缩反应,但是均没有消除PE引起的血管收缩差异;而2-APB及Nifedipine均明显抑制了两组血管收缩且消除了 PE引起的血管收缩差异;与VEH组相比,DEX组肠系膜动脉血管对Bayk8644介导的收缩反应明显增强;DEX组子代血管平滑肌细胞的Cav1.2通道电流密度明显高于对照组;与VEH组相比,DEX组PE引起的Cav1.2通道电流密度增加更明显。DEX组中胎鼠和子代成年鼠肠系膜动脉血管组织中IP3R1和Cav1.2的mRNA和蛋白表达水平均高于VEH组,而IP3R2、IP3R3和Cav3.2的mRNA和蛋白表达水平在两组间无明显差异。结论:产前GCs暴露可导致子代PE介导的肠系膜动脉血管收缩反应增强,这与血管IP3R1和Cav1.2表达上调进而导致IP3-Ca2+通路激活有关。
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