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帕金森疾病(Parkinson disease,PD)是中老年人常见的神经退行性疾病,严重影响患者的生活质量。在年龄超过60岁的人群中,PD患病率已经大于1%,且随着年龄的增长还具有升高的趋势。PD的病因和发病机制还未完全阐明。近年来,随着动物模型的使用使PD研究获得了突破性的进展,这为更加深入了解PD的发病过程、病因和分子机制提供了很大的帮助。最早建立PD疾病模型是利用利血平(Reserpine),随后依次出现了甲基苯丙胺(Methamphetamine)PD模型、6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)PD 模型、1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)PD模型、鱼藤酮(Rotenone)PD模型等,其中以6-OHDA模型和MPTP模型应用较多,而鱼藤酮作为一种新型的诱导药物所建立的PD模型可以显示出散发性PD(Sporadic Parkinson’s Disease,SPD)的多项特点。以基因学与环境毒素为基础创建的PD动物模型在揭示引起多巴胺能神经元(dopaminergic neuron)死亡的分子机制和发现潜在的治疗靶点方面具有重要意义。本文以家蚕为载体建立鱼藤酮诱导的家蚕帕金森疾病模型。主要研究结果如下:1.鱼藤酮对家蚕的毒力及亚致死剂量通过对家蚕舔食不同浓度鱼藤酮(10、5、2.5、1.25、0.4、Omg/kg/days),确定了鱼藤酮对家蚕的毒力及亚致死剂量值(LC5和LC10),分别0.473mg/kg/days 和 0.61 Omg/kg/days。2.亚致死剂量鱼藤酮对家蚕运动能力的影响。从家蚕幼虫2龄1天开始,每天舔食0.4mg/kg和0.2mg/kg鱼藤酮,发现家蚕体重,生存率显著降低,出现站立不稳,蜕皮困难,身体僵直,弯曲障碍等运动障碍。3.鱼藤酮导致家蚕脑部多巴胺能神经元损伤舔食鱼藤酮20天后,解剖取脑部,通过实时定量PCR发现家蚕脑部多巴胺生物合成关键酶酪氨酸羟化酶(TH)和多巴脱羧酶(DDC)等关键酶表达显著降低;通过高效液相色谱检测发现脑部多巴胺含量降低;免疫组化显示脑部多巴胺能神经元分子标记(TH)表达显著降低,即出现多巴胺能神经元损伤、缺失。4.鱼藤酮选择性损伤家蚕脑部多巴胺能神经元进一步通过高效液相色谱法测定脑部五羟色胺及乙酰胆碱,其含量没有明显降低,证明乙酰胆碱能神经元和五羟色胺能神经元相对不受影响;通过Tunel染色等发现家蚕脑部大小,形态无明显差异。由此得出亚致死剂量鱼藤酮选择性损伤脑部多巴胺能神经元。5.鱼藤酮导致家蚕脑部氧化应激紊乱及线粒体损伤通过测定发现鱼藤酮导致家蚕脑部活性氧含量和脂质氧化明显升高;谷胱甘肽(GSH)及超氧化物歧化酶(SOD)含量显著降低。即表明鱼藤酮导致家蚕氧化应激。通过测定发现ATP水平及线粒体膜电位显著降低,则说明鱼藤酮损伤家蚕脑部线粒体。同时测得DJ-1及UB mRNA表达显著升高。自噬相关蛋白ATG及ATG8表达显著升高。这些验证了氧化应激及线粒体损伤与帕金森疾病密切相关。6.抗震颤麻痹药左旋多巴对鱼藤酮诱导家蚕病理现象的影响通过舔食1mg/kg/day左旋多巴,家蚕运动能力显著改善,但多巴胺含量无明显改变,TH蛋白表达无明显改变。即左旋多巴只能改善运动障碍,不能保护鱼藤酮诱导的多巴胺能神经元损伤。