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氯胺酮,系苯环己哌啶(PCP)衍生物,于1962年首次人工合成,当初是作为PCP的替代品,消除PCP作为麻醉药的副作用,目前已成为一种新型麻醉药物。然而,自1971年美国旧金山和洛杉矶市首先报告的氯胺酮滥用病例以来,氯胺酮滥用迅速蔓延至周边国家。上个世纪90年代末,氯胺酮滥用流入日本,泰国等亚洲国家,并迅速蔓延到我国。近二十年来,我国滥用氯胺酮的比例连续攀升,香港特别行政区尤为严重。鉴于氯胺酮滥用全球化的严重性,建立准确、灵敏的检测方法十分必要。本研究主要内容如下:(1)噬菌体展示七肽库淘选氯胺酮模拟表位。以抗氯胺酮单克隆抗体为配体,在噬菌体七肽库中淘选氯胺酮的模拟表位,经四轮淘选后,随机挑取10个克隆,以间接非竞争ELISA和间接竞争ELISA确定模拟表位克隆5个。5个模拟表位克隆测序,结果获得4种序列,4种氯胺酮模拟表位的氨基酸序列分别为天冬酰胺-亮氨酸-脯氨酸-丝氨酸-苏氨酸-苏氨酸-组氨酸,丙氨酸-丙氨酸-亮氨酸-脯氨酸-脯氨酸-酪氨酸-精氨酸,苏氨酸-亮氨酸-颉氨酸-天冬酰胺-精氨酸-脯氨酸-脯氨酸,赖氨酸-丙氨酸-脯氨酸-色氨酸-天冬酰胺-苯丙氨酸-苏氨酸。(2)氯胺酮间接竞争ELISA检测方法的建立。氯胺酮间接竞争ELISA方法中最佳抗原包被浓度0.5μg/mL;抗体稀释倍数1:8000。获得了该方法的竞争抑制曲线,该方法检测氯胺酮IC50值为17.55 ng/mL,最低检测限为0.68 ng/mL。(3)噬菌体模拟表位间接竞争ELISA氯胺酮检测方法的建立。在噬菌体模拟表位间接竞争ELISA检测方法的建立过程中,包被抗体浓度为1:4000,竞争反应中噬菌体P1、P2、P3和P4稀释倍数分别为1:104、1:104、1:103和1:103,其中以P2建立的检测灵敏度最好。获得了以P2噬菌体模拟表位的竞争抑制曲线,该方法IC50值为27.27 ng/mL,最低检测限为1.55 ng/mL。