论文部分内容阅读
我们实验室利用酵母单杂交的方法从一个番茄cDNA文库筛选到了四个基因,序列分析表明它们都含有一个高度保守的AP2 DNA结合区域,类似于ERF转录因子。因为它们都可以和乙烯及茉莉酸应答元件结合,所以把它们命名为JERF10,JERF26,JERE33,JERF36(即茉莉素和乙烯应答元件结合因子)。酵母体内激活实验表明它们都可以在酵母中活化含有GCC-box的报告基因表达。也已经证实它们均定位在细胞核中。 为了进一步了解这些基因在植物体内的调控作用,将它们分别构建在pROK2上获得超表达和反义载体,经PCR鉴定后,采用农杆菌渗透的方法转入烟草和番茄。通过PCR鉴定的转基因植株是:27个JERF10/26/33/36超表达转基因烟草株系和20个JERF10/26/33反义转基因番茄株系。部分超表达转基因烟草株系如JERF33-4等在T1代幼苗中表现出了3:1的分离比。同时JERF33-4和JERF33-5超表达转基因烟草株系的叶片有了明显改变,其表型类似于乙烯处理的植物表型,说明JERF33参与了含有GCC-box元件启动子的乙烯应答基因的表达调控过程。对超表达转基因烟草JERF33-4的进一步实验分析表明,含有GCC-box顺式元件的基因如Osmotin,prb-1b等基因在未经胁迫处理下表达,而在野生型烟草中不表达,说明JERF33可能作为转录激活子调控含GCC-box的基因表达。此外,JERF33-4超表达转基因烟草还表现出对低温和干旱胁迫的耐受性增强及矮化的表型,这种现象曾在一些超表达DREB转录因子的植物中发现。所有这些结果表明JERF33可能是一种正调控的反式作用因子,参与生物胁迫和非生物胁迫两种信号传递途径。