论文部分内容阅读
目的:应用基于核磁共振(NMR)的代谢组学方法,研究“干热-辛”民族药阿里红对寒湿证大鼠免疫功能的影响及其对大鼠血清和尿液代谢物的影响,寻找与阿里红作用寒湿证的可能的生物标志物及其代谢途径,验证与“发散”功效相关的药物靶点,综合评价阿里红的药性对机体代谢网络的影响,揭示其化学与生物学基础之间的网络关系。方法:利用寒湿环境将40只SPF级健康SD大鼠放入人工气候室中,连续3W,通过对大鼠一般状况的观察和内源性指标的检测,确认寒湿证大鼠模型造模成功。灌胃给药阿里红14天后取材,用Elisa检测试剂盒和免疫器官的脏器系数判断阿里红对寒湿证大鼠免疫功能的影响。用核磁共振波谱仪和代谢组学的方法寻找模型组与给药组大鼠间血清和尿液的差异性代谢物,用主成分分析法(principal components analysis,PCA)和偏最小二乘判别分析法(partial least squaresdiscriminant analysis,PLS-DA)来探讨药物阿里红对寒湿证大鼠代谢物及代谢通路的影响。结果:给药阿里红后,相比于模型组,给药组大鼠血清lgG(IgG-S)和呼吸道液lgG(IgG-R)的浓度相对降低(P<0.05),血清中胰蛋白酶(Trypsin)及蛋白酶激活受体-2(PAR-2)的表达相对减弱(P<0.05);脾脏系数及胸腺系数增大(P<0.05)。对上述四个指标在五个组别的皮尔森相关系数进行分析,未发现有明确的相关关系。经核磁共振检测和代谢组学方法分析,给药组大鼠相比于模型组,血清中VLDL、瓜氨酸、脂质、谷氨酸、乙酰基糖蛋白、脯氨酸、精氨酸、胆碱、α-葡萄糖、甘油、不饱和脂肪酸升高;而乳酸、丙氨酸在不同化学位移处表现出了不同的变化趋势。相比于模型组,给药组大鼠尿液中缬氨酸、2,3-二羟基异戊二酸、十二烷酸盐、3-氨基异戊酸、脯氨酸、2-氧代异己酸、次牛磺酸、甘露醇、2-甲基甘氨酸、天冬氨酸、马尿酸、苹果酸、酪氨酸含量升高;牛磺酸、乙酰乙酸降低。结论:阿里红可以改变寒湿证大鼠的代谢,使寒湿证大鼠免疫功能恢复,增强胰蛋白酶及蛋白酶激活受体-2的表达,减小脾脏系数及胸腺系数。寒湿环境可导致血清和尿液中多种代谢物发生显著变化,并影响多条代谢通路。