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本文旨在建立从鹅鱼皮中同时提取、分离得到胶原蛋白和硫酸皮肤素(Dennatan sulfate, DS)的方法,并对其结构和活性进行研究,为提取工艺的利用与胶原蛋白和DS的功能开发提供理论依据。主要研究内容如下:1.建立了以鹅鱼皮为原材料,从中同时提取分离得到胶原蛋白和DS的方法。通过正交实验建立了最佳提取工艺,最佳工艺为:木瓜蛋白酶用量为4000IU/g,料液比为1:20,pH为7,在50℃下提取8h。在此条件下胶原蛋白提取率为59.4%,DS的提取量最高可达52.9mg/100g。2.对所提取鹅鱼皮胶原蛋白的理化性质进行研究。SDS-PAGE电泳分析表明胶原蛋白是由α1、α2、β三条肽链组成,为Ⅰ型胶原蛋白。氨基酸分析中,组氨酸含量最高,达22.53%,亚氨基酸含量占氨基酸总量的12.06%,不含色氨酸,该氨基酸组成符合Ⅰ型胶原蛋白的氨基酸组成结构。在紫外光谱下,胶原蛋白的最大吸收峰为227nm;红外分析显示,胶原蛋白的三螺旋结构保存完整。最后对胶原蛋白的热变温度进行测定,结果表明热变温度为22.3℃。3.在对鹅鱼DS的结构研究中,经化学分析,DS氨基已糖含量为31.2%,葡萄糖醛酸含量为30.46%,水分含量和N含量分别为7.63%和2.35%。DS的凝胶电泳结果显示其分子量在15-22kDa,证明所提取的DS纯度较高,不含其他糖胺聚糖。在DS二糖分析中表明,DS具有4种不同种类的二糖,且每种二糖所占总量的比例分别为△Di-OS (18.5%)△Di-6S(30.1%)、△Di-4S(44.9%)、△Di-diS(6.5%),从而得出鹅鱼DS主要是由DS-4和DS-6混合组成。在寡糖片段分析中,得出部分寡糖片段的结构为:dp2:IdoAS1-GalNAcS1;dp4:dIdoAS1-GalNAcS1-IdoAS1-GalNA;dp6:dIdoAS1-GalNAcS1-IdoAS1-GalNAcS1-IdoA-GalNAcS1;dp8:dIdoAS1-GalNAcS1-IdoAS1-GalAcS1-IdoA-GalNAcS1-IdoA-GalNAcS1;dp10:dIdoA-GaINAc-(IdoA-GalNAc)4。在最后进行的核磁分析中进一步确定了本研究所提取的糖胺聚糖为DS,同时证明鹅鱼DS的种类主要为DS-4和DS-6。4.在鹅鱼皮胶原蛋白的体外活性研究中,胶原蛋白表现出了良好的吸湿性和保湿性,可作为化妆品的原材料。此外,在对胶原蛋白溶解性和凝胶性的研究中表明其溶解度在pH为4.5时达到最大值13.6%,在pH为6时达到最小值7.2%;胶原蛋白的凝胶能力分别在pH=7时和NaCl浓度为250mmol/L时达到最大。5.体外抗凝血试验表明,鹅鱼DS具有较好的抗凝血活性,其凝血机制主要是内源性凝血途径。体外破骨细胞抑制试验表明,鹅鱼DS能明显的抑制破骨细胞的生长,抑制率达到了57%,具有潜在的药物开发价值。