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目的:肝X受体（liver X Receptors，LXRs）属核受体超家族成员，作为配体激活型转录因子，大量研究表明它活化后具有抗炎效应。我们前期研究显示，在LPS诱导大鼠急性肺损伤（acute lung injury，ALI）模型中，LXRs激动剂T0901317预处理后可抑制大鼠肺部p65NF-κB蛋白的表达，减少肺部炎症因子分泌，从而减轻LPS诱导的ALI。然而，激活的LXRs是通过何种途径调控p65NF-κB蛋白表达尚不清楚。泛素化修饰作为蛋白质翻译后调控机制之一，NF-κB的亚基p65可通过泛素化途径降解。基于以上背景，我们以LPS刺激RAW264.7细胞建立炎症模型，探讨LXRs活化后是否可通过促进p65NF-κB泛素化抑制巨噬细胞炎症反应。 方法:首先,将LXRs激动剂T0901317（10ummol/L）预处理RAW264.7细胞12h，再予以LPS（10ng/ml）刺激6h，利用ELISA、PCR和Western blot技术分别检测TNF-α、IL-1β、IL-6及p65NF-κB基因和蛋白的表达水平。接着利用亚胺环己酮（Cycloheximide，CHX）处理LXRs活化后的RAW264.7细胞终止翻译，利用Western blot技术检测阻断翻译后0h、2h和4h p65NF-κB蛋白的表达，通过计算细胞内残余p65NF-κB的量，半定量分析其稳定性。最后予以MG-132处理LXRs活化后LPS刺激的RAW264.7细胞，利用Western blot技术检测p65NF-κB蛋白表达及其多聚泛素化水平，并利用ELISA技术检测细胞上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌。 结果：T0901317预处理可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞TNF-α、IL-1β、IL-6和p65NF-κB蛋白表达，但对p65NF-κB mRNA表达无明显影响。T0901317预处理的RAW264.7细胞经CHX阻断翻译2h和4h后，p65NF-κB蛋白表达明显减少，说明LXRs活化后是在翻译后水平导致p65NF-κB蛋白降解。予以MG-132阻断泛素蛋白酶体途径后，明显抑制经T0901317预处理的RAW264.7细胞p65NF-κB蛋白降解，并增加其多聚泛素化水平，逆转LXRs活化后对LPS处理的RAW264.7细胞炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的抑制。 结论：T0901317可负性调控NF-κB信号通路介导的下游炎症细胞因子IL-1β、IL-6及TNF-α表达，其机制可能为LXRs活化后促进p65NF-κB泛素化和泛素化降解。