【摘 要】
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为了获得癌症的相关基因,本室建立了一种以细胞生长为基础的功能筛选方法.首先构建定向的真核表达的人胎盘cDNA文库,建库时选用大于2kb的片段装入载体,保证cDNA文库中相当一
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为了获得癌症的相关基因,本室建立了一种以细胞生长为基础的功能筛选方法.首先构建定向的真核表达的人胎盘cDNA文库,建库时选用大于2kb的片段装入载体,保证cDNA文库中相当一部分是全长基因.通过高通量基因转染体外培养的细胞来筛选人胎盘cDNA文库,寻找对肿瘤细胞生长、分化、凋亡有较明显影响的基因.经测序分析为有意义新基因的非全长cDNA,通过RACE方法获得全长cDNA,并对这些基因进行功能研究.免疫组化实验表明,BNIPL在肝癌癌旁组织中表达比相应的癌组织中要高.如果使其在肝癌细胞株BEL7402中过量表达,会抑制细胞的生长.如果将反义BNIPL_vl cDNA转染进BEL7402细胞中,发现Bcl2的表达大大提高.这些结果提示了BNIPL对细胞有抑制生长或促进凋亡的作用.并且很可能在cdc42信号传导途径和细胞的凋亡途径中起着crosstalk的作用.
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