桔梗是桔梗科植物桔梗Platycodon grandiflorum(Jacq.)A.DC.的干燥根。在国家新药“芩百清肺浓缩丸”的研制过程中,选用了经方“止嗽散”为基础进行加减,其中药食同源的桔梗,作为舟楫之药,起到了不可替代的作用,桔梗皂苷一直是“祛邪”药效学研究的热点,而其中含量丰富的多糖则是本研究(扶正)的重点。本文以桔梗为研究对象,对其多糖进行提取分离,通过体外抑制肺炎支原体和抗氧化实验,筛选出活性较强的桔梗多糖片段(PGP-D),并对筛选出的多糖做进一步的纯化及结构分析,为优化剂型、进一步探讨构效关系提供理论依据。本研究首先以桔梗多糖为指标,优选了桔梗的最佳产地为:安徽亳州。通过热水回流提取法提取桔梗多糖,采用响应面分析法对桔梗多糖提取的工艺条件进行优化,确定了最佳的工艺参数,料液比1:31.41,提取温度92.76℃,提取时间2.45 h,提取次数2.82次,该条件下桔梗多糖提取率为50.24%。建议实际应用参数为料液比1:31,提取温度93℃,提取时间2.5 h,提取次数为3次,提取率为49.85%。采用Sevage法除蛋白,并对其去除次数进行了比较,发现经过两次除蛋白后蛋白脱除率为28.49%,多糖保留率为81.16%,且桔梗多糖中蛋白只剩0.05%。对桔梗多糖三种脱色方法进行比较发现,活性炭法的脱色效果最差,几乎起不到脱色效果;AB-8树脂脱色效果最好,当脱色多糖溶液为7倍柱体积时,多糖的脱色率仍能达到75%以上;过氧化氢脱色效果较好,其添加量为5%时,脱色率为69.42%。脱色脱蛋白的桔梗多糖经乙醇分级得到桔梗多糖PGP-B,PGP-C和PGP-D,其多糖含量分别为73.33%、72.45%和80.83%;特性粘度[η]分别为28.56,9.71和4.10;粘均分子量分别为1.35×105,2.90×104和8.45×103。抑制肺炎支原体活性实验表明多糖没有抗肺炎支原体的活性;而体外抗氧化实验表明PGP-B,PGP-C和PGP-D均具有一定的自由基清除能力和总还原能力,但没有阳性对照抗坏血酸效果好,经比较PGP-D的抗氧化能力最好。PGP-D经DEAE-52纯化后得到PGP-D-a和PGP-D-b两个多糖组分,经红外光谱鉴定可知,这两个组分都具有多糖特有的官能团,均为多糖类化合物。对PGP-D-a的单糖组成进行分析,可知PGP-D-a主要是由L-鼠李糖、D-阿拉伯糖、D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖和D-半乳糖组成的。PGP-D-a中各单糖摩尔比为0.30:1.00:0.33:0.94:1.77:0.67,其中葡萄糖含量最多。核磁共振光谱分析可知PGP-D-a-1可能具有Glc(1→3)Ara、Glc(1→4)Glc和β-Glc(1→4)-β-Glc(1→4)-α-Glc三种构型,在PGP-D-a-1中不含甲氧基、糖醛酸和糖蛋白。