论文部分内容阅读
L-乳酸是乳酸的三种结构之一,在人、动植物和微生物中广泛存在。在食品等许多领域有重要应用,尤其是作为聚L-乳酸这种生物降解材料的前体。目前主要以微生物发酵生产为主,而菌种是微生物发酵的关键,优良的发酵菌种可以提高生产的效率,节约生产成本。研究以复合诱变的方法获得优良发酵菌种,确定其基本发酵条件,对L-乳酸的发酵生产有一定重要的意义。所以本论文以嗜热乳杆菌为出发菌株,对其进行X射线辐照,通过碳酸钙-溴甲酚紫筛选平板和一次发酵试验进行初筛,再进行二次发酵复筛,筛选得到一株突变株,在该突变株的基础上再进行重离子复合诱变处理,筛选得到最终突变株。最后对最终筛选得到的高产酸突变株的培养条件进行初步研究。研究结果如下:(1)对出发菌株进行X射线诱变,筛选得到SR7突变菌,发酵产酸平均量是22g/L,产酸量提高了15.04%,且多次重复试验证明该SR7突变菌有良好稳定的产酸遗传性。(2)将突变菌株SR7进行重离子诱变,筛选得到SRZ50突变菌,发酵产酸平均量是24.5g/L,产酸量提高了11%,且多次重复试验证明该SRZ50突变菌有良好稳定的产酸遗传性,并对SRZ50做了定性鉴定。(3)运用Box-Behnken设计试验进行对SRZ50突变株进行发酵培养基优化结果为:葡萄糖6.18%、酵母粉0.33%、乙酸钠0.22%、磷酸氢二钾0.1%。并对最终突变株的培养条件进行初步研究,得到初步发酵温度50℃、pH7.0、菌龄18h、装液量50m L/250mL、接种量5%、发酵方式为100r/min摇4h后静止培养、碳酸钙浓度2.5%。最终突变株SRZ50产L-乳酸,产量高、纯度高、产酸稳定。发酵72h产酸量为41.18g/L、糖酸转化率为86%,糖利用率为90%。