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HCV是引起慢性肝炎、肝硬化和肝癌的主要因素之一，其感染人群占世界人口的2％。HCV属于黄病毒科，肝炎病毒属，是一种基因组长度为9.6kb的单股正链RNA病毒，由5非编码区域、3非编码区域以及中间一个编码多聚蛋白的阅读框架组成。由于HCV维持高水平的复制效率，并且负责复制的RNA依赖的RNA聚合酶(NS5B)缺乏校正功能，这导致HCV产生高度的遗传变异，致使HCV疫苗的开发和抗病毒药物的发展面临重重困难。目前慢性HCV感染的标准治疗方案为聚乙二醇化干扰素和病毒唑的联合疗法。该治疗方法不仅价格昂贵，引起抗性和各种副作用，并且只对部分病人有效果。近年来，特异性抑制HCV病毒蛋白的抗病毒药物发展取得巨大的突破，如NS3/4A丝氨酸蛋白酶抑制剂boceprevir和telaprevir。但是这些特异性针对病毒蛋白的药物会很快引起药物抗性，限制了它们的优势。因此发展新的、具有良好的耐受能力以及高效的抗HCV病毒药物仍然迫在眉睫。本文阐述了甲基转移酶及其抑制剂对HCV生活周期的影响，探讨了HCV与宿主的相互作用机制。该研究结果促进了人们对HCV感染分子致病机制的理解，并为HCV的预防和治疗提供了理论依据。
本研究分为三个部分：第一章，引言。介绍HCV的流行病学、基因组结构、编码蛋白及其功能、生活周期以及模式系统等研究概况。同时也介绍了DNA甲基转移酶和甲基转移酶抑制剂在肝细胞癌症发展以及抗病毒效应中的作用。特别介绍了具有DNA甲基转移酶抑制效应的表没食子儿茶素没食子酸酯((-)-Epigallocatechin-3-gallate，EGCG)的各种生化生理功能。最后阐述了本研究的目的和意义。第二章，验证了DNMT1和DNMT3B在HCV感染和复制中的重要作用。首先我们获得了具有感染性的JFH1和含有GFP报告基因的J399EM病毒。然后阐述了DNA甲基转移酶抑制剂5-Aza-C和5-Aza-dC对HCV感染、基因组RNA合成以及病毒蛋白表达的抑制作用。此外还构建了DNMT1shRNA、DNMT3AshRNA和DNMT3B shRNA稳定表达细胞系，分别成功地抑制了这三个基因的表达。验证了DNMT1和DNMT3B为HCV感染所必需，进一步证实了DNMT1和DNMT3B基因被干扰后，能够影响HCV亚复制子的复制，但是对病毒的进入和IRES依赖的翻译并没有影响。第三章，检测了EGCG抗HCV效应以及对HCV生活周期的影响。EGCG能够抑制HCV细胞培养系统中感染性病毒粒子的产生。该抑制效应的机理主要在于失活病毒粒子和抑制病毒基因组的复制，但不影响IRES依赖的翻译。另外，当HCV病毒在50μM和25μMEGCG的药物浓度下传代时，分别传至第5代和第2代时，病毒完全从细胞培养中被清除。这些结果显示了EGCG具有对HCV预防和化学治疗的巨大潜能。最后，EGCG还能以剂量依赖的方式激活IFN启动子和干扰素刺激反应元件(ISRE)荧光素酶报告基因的活性。但是EGCG不能够抑制NS3/4A丝氨酸蛋白酶对线粒体抗病毒信号蛋白MAVS的切割。综上所述，本文阐述了DNA甲基转移酶DNMT1和DNMT3B在HCV感染性病毒产生和基因组复制过程中的重要作用，以及DNA甲基转移酶抑制剂5-Aza-C、5-Aza-dC和EGCG在抗HCV感染中的重要作用。这对HCV的复制、致病机理以及HCV的预防和抗病毒药物的发展具有重要意义。