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目的：利用亲和层析法从腹水中纯化抗人血小板糖蛋白Ⅲa(GPⅢa)单克隆抗体(McAb)SZ-21，以2.亚氨噻吩盐酸盐(2-IT)修饰法进行放射性核素<99>Tc标记，并探讨<99>Tc-SZ-21在兔股动脉血栓模型放免显像中的应用价值。
方法：(1)SZ-21的分离与纯化以人血小板包板，间接ELISA法筛选高效价的抗血小板GPⅢa单抗SZ-21腹水。采用蛋白G亲和层析分离纯化抗体，透析后以30％的聚乙二醇(PEG20000)进行浓缩，紫外分光光度法定量。 (2)SZ-21的活性鉴定采用SDS-PAGE电泳进行抗体纯度及分子量鉴定。分别以人和兔的血小板提供GPⅢa抗原，异硫氰酸荧光素标记的羊抗鼠抗体(FITC-GAM)为检测二抗，小鼠IgG为阴性对照，流式细胞仪(FCM)确定SZ-21与血小板的结合能力。 (3)<99>Tc标记SZ-21将分离纯化获得的SZ-21用2-IT法修饰后进行<99>Tc标记，并对<99>Tc-SZ-21的标记率和稳定性进行测定。(4)动物血栓模型的制各取6只新西兰大白兔，雌雄不论，体重1.8～2.7kg，5只于右侧股动脉植入自制的单股螺旋铜丝支架，1只于右侧胫动脉植入。拍摄X线片以确定支架位置。 (5)血栓放射免疫显像5只实验兔经耳缘静脉注射<99>Tc-SZ-21后进行显像，1只实验兔注入<99>Tc-GH作为阴性对照，在30min～3h内的不同时间点进行SPECT平面显像，观察血栓部位放射性分布，勾划血栓部位及临近肌肉组织及对侧股动脉感兴趣区(ROI)，计算血栓与周围肌肉组织(T/M)和血栓与对侧血管(T/B)ROI比值。(6)<99>Tc-SZ-21体内生物学分布对2只实验兔分别于注射<99>Tc-SZ-21后2min～3h不同时间点经对侧耳缘静脉采血，测量放射性计数，观察药物血液廓清情况。3h显像结束后处死动物，分离局部含血栓血管段及对侧同一长度血管进行离体显像，取心、肝、脾、肺、肾、胃、肠等组织，称重、测定放射性计数，计算％ID/g。
结果：
(1)经亲和层析及PEG浓缩后的抗体浓度为2mg/mL，SDS—PAGE电泳证实纯化后产物纯度在95％以上。
(2)FCM检测结果表明SZ-21与人、兔血小板OpⅢa：均有很强的的结合能力，SZ-21与两者结合的阳性细胞百分率分别为为98％，97％。
(3)<99>Tc标记SZ-21并经纯化后放射化学纯度大于90％，在体外可稳定6小时以上，并保持较高的免疫活性。
(4)兔股动脉血栓模型显像结果表明，注射<99>Tc-SZ-21后30min，血栓开始显影，至注射后2h时，血栓影像清晰；血栓模型活体显像时T/M和T/B比值分别为2.55±0.72和1.94±0.5 1，离体显像时T/B比值为4.43±1.5。
结论：采用蛋白G对抗体进行分离和纯化具有高效、快速、纯化效果好的优点。<99>Tc-SZ-21与新鲜血栓具有较好的结合能力，靶与非靶组织比值高，能够对血栓进行早期、快速地成像，对于早期血栓性疾病的放射免疫显像有一定的可行性。