血肿抽吸术对脑出血后早期基质金属蛋白酶9的影响

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shixibaogao007
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目的:脑出血是神经系统的常见疾病,是影响人类生存及生活质量的最严重的疾病之一。脑出血后脑水肿是由于不同原因影响脑组织,使其含水量增加导致脑的容积增大,颅内压增高,一般以血管源性水肿为主,是脑出血患者病情恶化和死亡的主要原因。进一步研究脑出血后脑水肿的病因和变化规律,及减轻脑水肿的方法具有十分重要的临床意义。因此,本实验的目的在于通过对兔脑出血模型应用血肿抽吸术,检测脑含水量,脑组织基质金属蛋白酶9(MMP-9)的动态变化,探讨血肿抽吸术对脑水肿及MMP-9表达的影响及其机制。方法:选用健康新西兰大白兔35只,雌雄不拘,体重2000-2500克,随即分为4组,假手术组(sham operation group,SO)5只,‘脑出血组(intracerebral hemorrhage group, ICH) 15只,抽吸组(aspiration group, AG)15只,后两组每组再分成6h、24h、3d三个时间点(处死时间),每时间点各5只。参照《常用实验动物脑立体定向图谱》,建立脑出血模型,脑出血模型制作成功后4h,再次麻醉、固定,缓慢向颅内相同部位注入尿激酶50μl(含UK2500u),2h后用1 ml注射器轻柔缓慢抽吸,结束后缓慢拔出注射器。用MRI (SWI序列)对动物脑内血肿进行检查,用神经功能缺损三级评分标准对动物进行神经功能缺失评分。称量不同分组脑组织干湿重,计算含水量。用免疫组化的方法测定脑组织MMP-9的阳性细胞数,用明胶酶谱分析检测脑组织MMP-9的活性。结果:脑出血组血肿部位表现为低信号,抽吸组血肿部位表现为等信号。光镜下观察,ICH组血肿周围组织略疏松、排列紊乱、基质有较轻微的水肿,神经元数目减少,嗜中性粒细胞、巨噬细胞浸润。ICH组6h脑组织含水量开始升高,72h达到峰值,与假手术组相比有显著增高(P<0.05)。抽吸组与ICH组相比,6h、24h无差别,72h与B组相比显著下降(P<0.05)。免疫组化结果显示,MMP-9主要分布于神经元及胶质细胞的细胞膜及胞浆中,假手术组手术侧周围组织仅可见很少量MMP-9阳性细胞。ICH组在6h时即有MMP-9阳性细胞表达并逐渐增多,72h达到高峰,各时间点都较A组显著增多(P<0.01)。ICH组、抽吸组两组比较,6h、24h时间点MMP-9阳性表达细胞数无显著差异,72h时间点抽吸组MMP-9阳性表达细胞数较ICH组减少(P<0.05)。用酶谱法检测MMP-9活性,在蓝色凝胶背景上出现的白色条带为酶活性所在部位。假手术组脑组织MMP-9未见表达,。ICH组、抽吸组在脑出血术后6h时MMP-9的酶原和活性形式表达都增多,72h达到高峰。72h时间点抽吸组MMP-9酶原和活性形式表达较ICH组减(P<0.05)。结论:1血肿抽吸术后72h,兔脑组织MMP-9的表达明显减少;2血肿抽吸组6h,脑含水量较脑出血组高,24h无差异,72h较脑出血组明显降低;3脑出血后脑水肿与MMP-9的表达呈正相关。
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