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缝隙连接(Gap junction,GJ)是相邻心肌细胞进行直接通讯的唯一通道,由缝隙连接蛋白(Connexin,Cx)组成。在心脏中,缝隙连接蛋白主要包括Cx40、Cx43、Cx45等。Cx40主要存在于心房、房室结、希氏束和心室传导系统中;Cx43在心房、心室及传导系统远端表达丰富;Cx45存在于窦房结、房室结、希氏束和左右束支,心房和心室中Cx45水平较低,在心房水平略高于心室。对高血压肥厚左室和房颤的研究发现,Cx重构是心脏结构重构和电重构的重要因素。一项对老龄和主动脉缩窄致纤维化小鼠的研究显示,降低心室肌Cx43基因表达,使成纤维细胞的活化增强,心肌纤维化增加,提示恢复Cx43功能也可能有益地影响了心肌结构重构。在各种病理状态下,Cx重构,包括Cx表达量的改变、重新分布及异常组合、通道功能的紊乱等,均可使GJ通讯功能下降,使心房传导速度减慢,传导方向不一致,易于形成折返,而引起心律失常的发生。临床研究发现长期高血压不仅会引起心室肥厚、扩张,甚至导致心力衰竭,其对心房结构、功能也会产生影响,包括引起心房扩张、纤维化、出现房性早搏、房扑、房颤等心律失常。但目前对于高血压心脏重构的研究多侧重于心室,针对心房及相关心律失常的研究较少。如前所述,Cx重构与高血压心室重构有关,其是否在心房重构中也发挥着同样重要的作用仍需阐明。为此,本试验观察了自发性高血压大鼠心房结构变化情况,检测了心房Cx变化,及其变化的信号转导途径。同时,临床研究显示,血管紧张素转换酶抑制剂对高血压患者心房颤动的发生具有一定的预防作用,并已在临床治疗指南中得到推荐,其预防房颤的作用是否与改善Cx重构,抑制心房重构有关,目前仍不明确,为此,我们同时观察了培哚普利治疗自发性高血压大鼠的效果及对心房重构的影响,以期为临床治疗提供依据。目的:探讨Cx40、Cx43在高血压左心房重构中的作用,并观察培哚普利的干预效果。方法:12只SHR大鼠适应性喂养1周后随机分为两组:高血压组(SHR组)和培哚普利组(SHR-P组),6只Wistar大鼠为正常血压对照组(Wistar组)。SHR-P组给予培哚普利2mg/kg/d灌胃,SHR组和Wistar组给予等体积蒸馏水灌胃,每2周测量血压1次。适应性喂养1周后及干预15周后行超声心动图检查;试剂盒测定血浆Ang II含量;心肌组织HE染色检测心肌形态学变化;RT-PCR检测Cx40、Cx43基因表达量;Western-blot检测Cx40、Cx43、JNK、p-JNK蛋白表达量。结果:1一般情况SHR组大鼠毛发稀疏,易激惹。Wistar组大鼠毛发光滑,无激惹表现。在15周实验过程中,Wistar组大鼠无一例死亡,SHR组大鼠死亡1只,SHR-P组大鼠死亡1只。2三组大鼠间血压(收缩压)值比较从9周龄开始,与Wistar组比较,SHR组及SHR-P组大鼠尾动脉的收缩压均明显升高(P<0.05);与SHR组比较,SHR-P组大鼠尾动脉的收缩压明显降低(P<0.05)。3三组大鼠超声心动图指数实验开始(9周龄)及结束(23周龄)时分别对各组大鼠行超声心动图检查。9周龄时,LAD、IVST、PWT、LVEDD、LVESD、LVEF和HR各组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。23周龄时,Wistar组、SHR组、SHR-P组大鼠的LAD值分别为2.12±0.07mm、2.99±0.12mm、2.72±0.25mm,3组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。与Wistar组比较,SHR组及SHR-P组大鼠LAD增加(P<0.05),与SHR组比较,SHR-P组大鼠LAD增加程度减缓(P<0.05)。Wistar组、SHR组、SHR-P组大鼠的IVST值分别为2.06±0.23mm、2.68±0.09mm、2.40±0.11mm,PWT值分别为2.28±0.16mm、2.76±0.28mm、2.44±0.10mm,3组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。与Wistar组比较,SHR组及SHR-P组大鼠IVST和PWT增加(P<0.05),与SHR组比较,SHR-P组大鼠IVST和PWT增加程度减缓(P<0.05)。LVEDD、LVESD、LVEF和HR各组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。Wistar组、SHR组、SHR-P组大鼠血浆Ang II水平分别为256±23.87 ng/l、403.8±35.36ng/l、396.4±29.42ng/l,3组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。与Wistar组比较,SHR组及SHR-P组大鼠血浆中Ang II水平均明显升高(P<0.05),与SHR组比较,SHR-P组大鼠血浆中Ang II水平显著降低(P<0.05)。5三组大鼠心肌组织HE染色心肌形态学变化Wistar组:心肌细胞排列致密、整齐,细胞较规则,形态正常,间质成纤维细胞数量、形态正常,无显著病理改变。SHR组:心肌细胞体积增大,核大,胞质浓染,排列疏松、紊乱,甚至可见纤维断裂,间质出现纤维沉积,并将心肌细胞分割呈网筛状,可见少量炎性细胞浸润。SHR-P组:心肌细胞走行、间质纤维增多程度以及间质纤维排列不规则程度较SHR组有一定程度的减轻。6三组大鼠心肌Cx40m RNA、Cx43m RNA表达情况与Wistar组比较,SHR组及SHR-P组大鼠心肌组织中Cx40m RNA、Cx43m RNA水平均明显下降(P<0.05),与SHR组比较,SHR-P组大鼠心肌组织中Cx40 m RNA、Cx43m RNA水平均明显升高(P<0.05)。7三组大鼠心肌Cx40、Cx43、JNK、p-JNK表达情况与Wistar组比较,SHR组及SHR-P组大鼠心肌组织中Cx40、Cx43水平均明显下降(P<0.05),与SHR组比较,SHR-P组大鼠心肌组织中Cx40、Cx43水平均明显升高(P<0.05)。同时发现,与Wistar组比较,SHR组及SHR-P组大鼠心肌组织中JNK、p-JNK水平均明显升高(P<0.05),与SHR组比较,SHR-P组大鼠心肌组织中JNK、p-JNK水平均明显下降(P<0.05)。结论:1 SHR组大鼠心房显著扩大,心房肌细胞排列紊乱,纤维化明显,提示高血压可导致心房结构重构。2 SHR组大鼠心房肌组织中Cx40、Cx43的数量减少,同时JNK、p-JNK水平升高,提示Cx变化可能与心房组织的重构有关,而JNK信号通路的激活对Cx功能具有调节作用。3 SHR组大鼠血浆Ang II浓度升高,而Ang II对JNK信号通路具有调节作用,故抑制Ang II功能,可能具有预防心房重构的作用。4三组大鼠血浆Ang II水平4培哚普利治疗组,心房扩大程度较SHR组轻,心房Cx40、Cx43水平增高,血浆Ang II浓度、JNK、p-JNK降低,提示培哚普利在降低血压的同时,可改善心房重构,其机制可能与改善Cx重构有关。