【摘 要】
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巨噬细胞天然抵抗力相关蛋白基因（Natural Resistance associated MacrophageProtein1gene, Nramp1）也被称作Slc11a1基因，在小鼠中对细胞内病原体的抵抗起着关键性的作用，如各种沙门氏菌（Salmonella）血清型、分枝杆菌（Mycobacterium lepraemurium）、胞内分枝杆菌（M. intracellulare）、牛分枝杆
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巨噬细胞天然抵抗力相关蛋白基因（Natural Resistance associated MacrophageProtein1gene, Nramp1）也被称作Slc11a1基因，在小鼠中对细胞内病原体的抵抗起着关键性的作用，如各种沙门氏菌（Salmonella）血清型、分枝杆菌（Mycobacterium lepraemurium）、胞内分枝杆菌（M. intracellulare）、牛分枝杆菌（M.bovis）和杜氏利什曼原虫（Leishmania donovani）等。Nramp1蛋白在巨噬细胞中主要表达在吞噬溶酶体膜上，在感染的早期阶段通过其阳离子运输功能限制胞内病原的增值，以增强巨噬细胞抵抗病原体的能力，它可以改变巨噬细胞内部的铁代谢，包括使细胞质的含铁量减少，增强细胞铁输出，来限制胞内菌对铁的利用。Nramp1也被证明参与巨噬细胞吞噬红细胞时铁的回收利用。同时它还参与一些免疫信号通路活性的调节，如由增加抗菌效应分子的产生（如ROS和RNS）或通过Nramp1降低IL-10的表达促进NO的产生。 山羊Nramp1基因全长1647bp，定位于山羊2号常染色体长臂q12.2。在各个组织中，Nramp1主要分布于脾脏和肝脏，在其他组织中表达量很少或没有表达，其中，脾脏的表达量最高。本研究通过提取山羊脾脏总RNA，经RT-PCR获得Nramp1基因序列，将其插入真核表达载体PcDNA3.1（+），构建重组质粒PcDNA3.1（+）-Nramp1，将线性化的质粒转染羊胎儿成纤维细胞，筛选获得阳性细胞克隆，在基因组和RNA水平对细胞系进行检测，获得阳性细胞系两株。同时用原核注射的方法将载体注入小鼠0.5d受精胚胎，通过胚胎移植获得转基因小鼠，对转基因小鼠进行基因组和RNA水平检测，获得阳性转基因小鼠两只，对转基因小鼠Nramp1的组织分布进行检测，结果表明该基因在心、脾、肺、肾、睾丸、肌肉、鼠尾等组织均有表达，在肝脏表达量很少或没有表达。
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