目的 种植体与骨组织之间建立直接有序的结构功能连接，即骨整合（osseointegration），是评价种植体成功的重要指标。骨整合理论表达了生物相容性（biocompatibility）的意义。钛及钛合金是目前应用最广泛、生物相容性最好的口腔种植材料，现认为其良好的生物相容性与表面氧化膜有关。天然形成的氧化膜较薄，现多采用各种表面氧化技术处理钛及钛合金种植体，在表面形成机械氧化层。Ⅰ型胶原（type Ⅰ collagen）是一种细胞外基质的有机组成成分，是主要的骨结构蛋白。有研究表明，Ⅰ型胶原不但为骨矿化提供基质，而且可以促进成骨细胞进一步分化增殖，与成骨细胞的附着和伸展排列方向也有密切的关系。本实验中将表面氧化层加厚的Ti6Al4V合金种植材料植入大鼠下颌骨中，通过对种植体骨界面区的组织学研究和Ⅰ型胶原表达变化的免疫组化研究，来评价这种材料用作口腔种植体的生物学性能。 材料和方法 选用体重200-250克大鼠90只，雌雄各半，随机分成3组，每组内雌雄各半。2％戊巴比妥那（40毫克／千克）腹腔内注射全麻，在磨牙下方、外斜线上方的骨面用低速手机制备直径3mm、深1.2mm的种植窝，大量无菌生理盐水持续冲洗降温。植入3种合金：316L不锈钢合金，Ti6Al4V合金，处理钛合金（用阳极氧化法在表面形成5μmTiO₂钝化膜的合金材料），塑料镊压其就位。术后第1，2，3，4，6周分别断头处死动物。取材，4％多聚甲醛液固定一周，8％EDTA液脱钙两周，常规石蜡包埋。做7μm厚连续切片，进行HE染色和免疫组化SABC法染色(兔抗大鼠多克隆抗体人显微照相系统 CoolsnaPfr拍照，Metamorph图象分析仪和图象分析软件在 400倍镜下，对种植材料一骨界面区 1型胶原阳性部位的透光强度进行灰度值测定，每张切片随机选择4个视野，用平均灰度值表示染色强度。进行统计学分析。 结 果 1．HE染色观察处理钛合金组： 第1周：种植体周围被疏松结缔组织包统，界面区可见梭型或立方状成骨细胞，有少量类骨样组织；第2周：界面骨样组织增多，突入髓腔内，相互不规则连接，可见骨陷窝较大，血管丰富； 第3产周：新生骨增多，骨基质致密，骨陷窝较前期小，成骨细胞排列在新生骨表面，核大深染； 第6周：镜下新生骨进一步增多，骨小梁交织排列，骨陷窝小。无纤维组织，血管少。 2．I型胶原免疫组化染色结果： 种植体一骨界面区新生的骨基质、成骨细胞胞浆、未分化的间充质细胞胞浆都有1型胶原的免疫组化染色呈阳性。植人第1周，界面区的纤维结缔组织染色呈弱阳性。第八 周，免疫组化染色反应显著增强，阳性反应的高峰期表达在第ZI天。从第4周到第6周，染色强度下降，代表骨基质区的进人矿化期。 3．统计学检验显示，雌雄大鼠之间的总体平均灰度值经t检验无统计学差异沙＞o．05X将雌雄当一种变量处理。各个时间段处理钛合金组和 Ti6A14V组的平均灰度值高于 316 L组，处理钛合金组高于Ti6A14V组。各个时期3种材解均灰度值的差异均有统计学意义河＜0．05人 结 论 本实验采用大鼠下颌骨植人表面处理的Ti6A14V合金材料的 ·2· 动物模型，进行HE染色观察，用免疫组化法标记界面 1型胶原， 对种植体骨界面早期骨形成情况进行组织学观察。结果发现，I 型胶原作为骨基质的主要有机成分，在成骨细胞的增殖期表达强 烈，在骨基质的矿化期表达下降，可以作为研究早期骨形成状况的 指标。表面氧化膜增厚为 5 pm的处理钛合金材料，生物学特性优 于Ti6A14V，可以在早期诱导成骨细胞分化增殖，更多更迅速的形 成新生骨，有利于后期形成骨整合界面。316L不锈钢合金不适于 做口腔种植体。