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背景:人乳头瘤状病毒(Human Papillomavirus,HPV)感染是宫颈癌的主要病因。HPV编码的E6蛋白与p53蛋白和细胞内的E6相关蛋白(E6 associated protein,E6-AP)结合,经过泛素途径使p53降解,使正常细胞发生癌变,形成恶性肿瘤。p53的细胞内活性作用是维持遗传的稳定性,这主要体现在对细胞周期的阻滞、促进细胞凋亡和DNA修复。MDM2蛋白是细胞内调节p53浓度及活性的重要蛋白质,两者构成似电流环路中的负反馈,彼此相互进行精细的调节。MDM2以介导p53穿过核膜进入胞浆降解和对p53转录活性的直接抑制作用两种形式实现对p53功能的调节。黄酮类化合物(flavonoids compounds)是植物次生代谢产物,广泛地存在于自然植物中,结构类型复杂多样,表现出多种多样的药理活性,能防治心脑血管系统的疾病和呼吸系统的疾病,具有抗炎抑菌,降血糖,抗氧化,抗辐射,抗癌,抗肿瘤以及增强免疫能力等药理作用。黄酮类化合物已成为目前新药开发的热点。方法:用新合成的黄酮希夫碱二-(6-羟基-4-氧代-4H-苯并吡喃-3-基)-乙二亚胺(bis(6-hydroxy-4-oxo-4H-chromene-3-yl)-ethylenediimine,B6)在不同浓度下对Hela细胞处理不同时间。采用SRB、台盼蓝染色、检测化合物对Hela细胞的抑制作用;在相差显微镜下观察化合物的作用所引起的细胞形态的改变;用AO/EB双染,观察细胞的凋亡形态;琼脂糖凝胶电泳,化合物作用的细胞DNA形成条带;透射电镜观察细胞形成的凋亡小体;流式细胞术检测Hela细胞的凋亡以及细胞周期的阻滞;Western Blot检测p53、MDM2蛋白表达的变化。结果:SRB法检测到24h对Hela细胞的IC50为43.51μmol/L,;台盼蓝染色检测到化合物24h对Hela细胞有明显的抑制作用;相差显微镜和AO/EB双染紫外激发荧光显微镜下均观察到细胞质膜分离,细胞产生调亡小体;琼脂糖凝胶电泳紫外激发下可以观察到DNA在180~200bp间形成梯状条带;透射电镜下看到细胞染色质固缩、分离并沿核膜分布,细胞质亦发生固缩,细胞凋亡前体;流式细胞仪检测细胞被阻滞在G1期,细胞发生凋亡,调亡率在0μmol/L、40μmol/L、80μmol/L浓度时分别为0.05%,6.1%,8.6%;Western Blot检测p53蛋白的量随化合物浓度增加而增加,MDM2蛋白的量随p53蛋白的量增加而增加。以上结果说明该化合物能够诱导Hela细胞发生凋亡,促进p53表达,促使细胞凋亡,是一种具有抗肿瘤活性的化合物。