论文部分内容阅读
目的：研究促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对烫伤SD大鼠脑组织HSP27的表达和细胞凋亡的影响,探讨促红细胞生成素对大鼠脑组织的保护作用及可能的机制.。方法：选用健康SD大鼠55只(昆明医学院动物科提供),按照walker和Mason[78]报道的制作标准,建立大鼠烫伤模型。即将脱毛区置于96℃的热水中18秒,造成30%TBSAⅢ度烫伤来制作大鼠烫伤模型。将SD大鼠随机分为对照组、单纯烫伤组(烫伤组)、烫伤前EPO干预组(治疗组)。促红细胞生成素干预组于烫伤前2 h予腹腔注射促红细胞生成素3000u/Kg；烫伤组、正常对照组在烫伤前2 h予腹腔注射等量生理盐水。分别于烫伤后6小时、12小时、24小时、48小时、72小时五个时间点取脑组织。以免疫组织化学的方法和显微图像分析方法检测分析各组脑组织中HSp27的表达情况,以TUNEL法检测分析各组脑组织细胞凋亡情况,同时用HE染色观察各组脑组织的病理形态学变化,Nissl染色来观察Nissl小体的在烫伤后的损伤情况。结果：1.HE染色正常组：皮层神经细胞形态正常,数量多,排列整齐。烫伤组：神经细胞稀疏,细胞间隙增大,并可见大量细胞变性坏死,表现为包体皱缩,核固缩深染,核仁消失。治疗组：随着剂量增加,神经细胞存活数量明显增多,损伤程度减轻。2.Nissl染色正常组：皮层神经细胞膜呈蓝紫色,胞核呈饱满的淡蓝色,可见很多紫蓝色的尼氏小体,细胞排列整齐。烫伤组：尼氏小体溶解消失或很少；治疗组：与烫伤组相比尼氏小体增多。3.免疫组化检测正常对照组SD大鼠脑组织中可见少量HSP27的阳性表达,阳性信号主要位于神经元和胶质细胞胞浆中。烫伤后各时间点烫伤组和治疗组HSP27表达均较对照组明显升高(P<0.05),伤后12～24小时HSP70的表达到达高峰,48小时后逐渐减少,72小时明显减少。治疗组各时间点HSP27的表达水平分别高于烫伤组相同时间点HSP27的表达水平(P<0.05)4. TUNEL法检测正常对照组SD大鼠脑组织中可见少量凋亡细胞,烫伤后各时间点烫伤组和治疗组凋亡表达均较对照组明显升高(P<0.05),与HSP27的变化趋势一致。但治疗组各时间点凋亡细胞分别低于烫伤组相同时间点的凋亡细胞(P<0.05)。结论：严重烫伤早期SD大鼠脑组织损伤明显,早期应用EPO能够减轻烫伤后脑组织的损伤,EPO能够明显增强烫伤早期SD大鼠脑组织内HSP27的表达,并抑制细胞凋亡,其可能是EPO保护脑组织的重要机制之一