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根据国家药品安全“十二五”规划，国家食品药品监督管理总局决定，对2007年修订的《药品注册管理办法》实施之前批准的基本药物和临床常用仿制药，分期分批的进行质量一致性评价。仿制药质量一致性主要是指物质基础和临床疗效两个方面的一致。临床疗效的一致性主要是通过体外溶出试验和Ⅰ期临床生物等效性研究来评估。可以说临床验证（生物等效性研究）是仿制药一致性评价的“金标准”。仿制药质量一致性评价是持续提高药品质量的有效手段，对于提升制药行业的整体水平，保障公众用药的安全具有重要意义。生物等效性试验是比较同一种药物相同或不同剂型的制剂，在相同的试验条件下，其活性成分吸收程度和速度有无统计学差异的人体试验。高效液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）技术是目前生物等效性研究常用的分析方法，适合大多数药物的检测。本论文主要分两部分内容。 第一部分，LC-MS/MS分析方法的建立。 目的：对已参与实验药物的LC-MS/MS分析方法的建立进行总结，为今后快速的建立LC-MS/MS分析方法奠定良好的基础。 方法：本文结合自己在建立贝凡洛尔，兰索拉唑，头孢地尼，氟康唑，布桂嗪，瑞格列奈等药物的LC-MS/MS分析方法的实践，从质谱条件的优化，色谱条件的优化，样品前处理方法的选择，内标的选择等几个主要方面，对LC-MS/MS分析方法的建立进行了较为系统的分析梳理，初步总结了可供借鉴的心得。 结论：本论文总结提炼的生物样本的LC-MS/MS分析方法的建立有实用参考价值，有助于提高工作效率。 第二部分，实例-LC-MS/MS法在盐酸贝凡洛尔片生物等效性研究中的应用。 目的：建立LC-MS/MS法检测人血浆中贝凡洛尔浓度，并将其应用到盐酸贝凡洛尔片的生物等效性研究中。 方法：以普萘洛尔为内标，用正离子模式，MRM扫描方式进行检测定量，贝凡洛尔和内标离子对[M+H]+分别为m/z346.1-165.1和m/z260.3-116.1。血浆样品以乙腈为沉淀剂沉淀蛋白。色谱柱为Ultimate C18柱(5μm,2.1mm×150mm)，流动相为乙腈：10mM乙酸铵（含0.1％甲酸）水溶液（40:60,v/v）。 结果：该方法LLOQ为5.00ng/mL；线性范围为5.00～1000ng/mL；批内和批间精密度RSD均小于15％；提取回收率在91.98％～109.14％之间；内标归一化的ME在96.79％～108.73％之内。空腹状态下AUC0-36、AUC0-0-∞、Cmax的90％置信区间分别为95.6％～112.0％，95.9％～111.8％，98.5％～118.6％。受试制剂相对生物利用度F0-36为（106.2?27.0）％。进餐状态下AUC0-36、AUC0-0-∞、Cmax的90％置信区间分别为93.4％～108.7％，93.9％～109.8％，92.8％～106.4％。受试制剂相对生物利用度F0-36为（102.9?20.5）％。 结论：该法符合生物样品分析要求，已被应用于盐酸贝凡洛尔片生物等效性研究，结果表明两制剂具有生物等效性。 本论文突出之处：（1）本论文总结了平时在建立生物样品的LC-MS/MS分析方法的实践经验，为以后工作中快速的建立LC-MS/MS分析方法打下了良好的基础；（2）在贝凡洛尔的分析测试中，首次建立了LC-MS/MS法检测血浆中贝凡洛尔的药物浓度，与文献中的HPLC，GC相比，本论文采用简单的蛋白沉淀法处理样品，血浆用量少，仅为200ul；分析时间短，仅为3.5min；灵敏度高，LLOQ为5.00ng/mL。（3）本论文首次在中国健康受试者中进行了食物对贝凡洛尔的药动学的影响的研究。