本实验室采用GnT-V反义cDNA质粒转染SMMC7721细胞的方法，获得稳定表达株ASGnT-V7721，并用基因芯片技术检测其基因表达与SMMC7721细胞的差别，发现ASGnT-V7721细胞基因表达符合内质网应激的特征。而且，内质网应激标志性分子GRP78和XBP1及PERK的变化也证明了ASGnT-V7721细胞存在内质网应激。为了进一步证明GnT-V表达受阻特异性地诱导内质网应激，本论文采用RNAi技术，构建GnT-VsiRNA表达质粒并转染SMMC7721细胞，通过检测转染后细胞GnT-V的mRNA及蛋白质表达水平验证该GnT-VsiRNA表达质粒对细胞GnT-V表达的抑制作用，并且通过HRP标记凝集素ConA和DSA对细胞总蛋白的染色验证GnT-V表达抑制后其功能的变化。也就是说，GnT-VsiRNA表达质粒不但抑制了GnT-V的表达，而且阻碍了其功能。然后我们用RT-PCR及Westernblot分别检测ASGnT-V7721细胞GRP78和XBP1的mRNA及蛋白表达的变化，并检验了细胞中PERK的磷酸化状况，发现GRP78的mRNA和蛋白质表达量升高；XBP1的mRNA发生剪接，蛋白分子量从33KD变为54KD；PERK蛋白发生磷酸化。这些变化都符合内质网应激的特征。因此这部分的实验结果为“GnT-V表达受阻诱导内质网应激”提供了有利的佐证。本室以前的研究发现，ASGnT-V7721细胞在全反式维甲酸(ATRA)的诱导下凋亡敏感性增强。而剧烈的内质网应激也可以导致细胞凋亡。为了研究ASGnT-V7721细胞的凋亡与内质网应激的关系，我们检测了细胞中内质网应激特异性诱导的caspase-12以及凋亡相关转录因子CHOP的变化，发现了CHOP的表达量大大增加，而且在ATRA诱导下capase-12发生了剪切激活。