烟曲霉是自然界广泛存在的真菌,可以引起免疫功能低下的病人,尤其是进行了骨髓移植或器官移植的病人严重的机会感染。因为恶性肿瘤、粒细胞减少或功能障碍、糖皮质类固醇和免疫抑制剂的使用等原因造成的患者免疫功能缺陷,是侵袭性曲霉病的高危因素。烟曲霉孢子被患者吸入后,可以从气管肺泡中侵入到肺部造成初发的侵袭性感染,并常伴远隔器官的转移。近10 年来,侵袭性曲霉病发病率不断上升,并成为免疫抑制患者死亡的主要原因之一。对于免疫功能正常的人来说,它可以被肺泡巨噬细胞(PAM)杀灭并清除。然而烟曲霉孢子与肺泡巨噬细胞之间的关系尚未阐明。PAM 在肺组织感染的防御中起着十分重要的作用。当它被外来刺激物激活时,细胞外信号可通过与受体结合,激活信号级联通路并传递到达细胞核,激活或失活核转录因子,作用于目的基因的调控序列而引起相应蛋白质表达谱的改变。从而既提高自身吞噬、处理、递呈抗原的能力,又分泌多种细胞因子和化学趋化因子,如白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、巨噬细胞炎症蛋白(MIP)以及白三烯B4(LTB4)等,促进T、B 细胞的增殖、成熟,募集中性粒细胞至肺,全面提高肺的免疫能力以抵御外来刺激物的不良作用。实验证明,这些炎症因子在抗烟曲霉感染中起着重要作用。NF-κB 是广泛存在于真核生物中,一种由复杂的多肽亚单位组成的蛋白家族。它作为信号传导途径中的枢纽,与免疫、肿瘤的发生、发展,细胞凋亡的调节以及胚胎发育等重要事件有着密切联系,是一种重要的核转录因子。研究发现,在烟曲霉感染中,PAM 的NF-κB 信号转导通路的激活可能起着重要作用。本实验以PAM 为研究靶细胞,经烟曲霉孢子及其代谢产物的刺激,分别观察PAM的形态学改变、肺泡巨噬细胞炎症因子的释放水平的改变以及相关信号通路的研究,为进一步探讨肺烟曲霉病的发病机制的研究奠定基础。我们首先建立并稳定了正常PAM 和免疫抑制PAM 体外培养模型,经瑞氏染色和巨噬细胞的标记抗原CD68 行免疫组化试验对巨噬细胞进行了鉴定。在此基础上,将肺泡巨噬细胞与烟曲霉孢子及其代谢产物共孵育,通过扫描电镜和透射电镜观察PAM形态学变化。我们发现,正常PAM 表面有大量微皱褶或微皱襞,在被烟曲霉孢子激活后,PAM 可以明显增大细胞的表面积,即可以使一个巨噬细胞同时粘附和吞噬多个