【摘 要】
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Turnip crinkle virus(TCV)是卡莫病毒家族的成员,其基因组是以RNA形式存在于蛋白质病毒外壳中。该病毒的亚基因组RNA1则表达两个重叠的移动蛋白(MP)P8和P9,这两个蛋白参与TCV病毒细胞间和长距离的扩散,同时还参与病毒诱导的宿主RNA沉默的细胞间传播。对于拟南芥中与TCV病毒P8蛋白相互作用的Atp8蛋白已在本世纪初得到验证和分析。本课题则关注烟草Nicotiana b
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Turnip crinkle virus(TCV)是卡莫病毒家族的成员,其基因组是以RNA形式存在于蛋白质病毒外壳中。该病毒的亚基因组RNA1则表达两个重叠的移动蛋白(MP)P8和P9,这两个蛋白参与TCV病毒细胞间和长距离的扩散,同时还参与病毒诱导的宿主RNA沉默的细胞间传播。对于拟南芥中与TCV病毒P8蛋白相互作用的Atp8蛋白已在本世纪初得到验证和分析。本课题则关注烟草Nicotiana benthamiana中Nbp8蛋白与TCV病毒P8蛋白的相互作用以及烟草N.benthamiana中可能与TCVp8蛋白相互作用的蛋白,以期待进一步揭示烟草蛋白与TCVp8蛋白的互作对病毒诱导的RNA沉默在细胞间传播的调控机制。对Atp8蛋白在烟草N.benthamiana中的同源蛋白Nbp8与TCVp8蛋白酵母双杂交互作的验证实验发现,Nbp8与TCVp8未表现明显的相互作用。TCVp8对拟南芥cDNA文库的酵母筛库及同源比对得到159个与TCVp8互作的蛋白,参考前人的研究和基因重复出现的次数最终确定Nb AT5G37740,Nb SYTA,Nb CSN5A和Nb WRKY21进行进一步筛选验证。已验证了Nb CSN5A与TCVp8在酵母双杂交实验中未表现明确的相互作用。下一步将验证筛选出的其他蛋白与TCVp8互作的情况,进而构建遗传材料以验证互作蛋白在TCVp8对RNA沉默细胞间传播过程中所起的作用。在确定了与TCVp8互作的蛋白后,可以探究在TCV侵染过程中,TCV对短距离RNA沉默传播影响的机制,进而提出一种植物抗病的新的可能。
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