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背景与目的人类和动物血管生成与肿瘤生长、侵袭、转移密切相关,肿瘤的血管形成（Angiogenesis）是一个相当复杂的过程,受多种因子的正负调控,血管内皮生长因子（VascularEndothelial Growth Factor,VEGF）（正性调控因子）能特异性与血管内皮生长因子受体（Vascular Endothelial Growth Factor Recepter,VEGFR）结合,促进内皮细胞的分裂、增殖及迁移,在肿瘤新生血管生成过程中起着至关重要的作用,抗血管生成疗法已有效应用于肿瘤治疗。已发现的VEGFR有三种:VEGFRI（FLT-1）、VEGFR2（FLK-1、KDR）和FLT-4,VEGFR1在VEGF相关的病理性血管形成中发挥了重要作用,其在乳腺癌细胞中阳性表达率达80%。理论上如果抑制VEGFR1的表达,即应阻止肿瘤血管的生成从而抑制肿瘤生长/细胞增殖,成为肿瘤治疗的一个途径。因此,本课题采用化学修饰的siRNA在体内外敲减VEGFR1基因,探讨化学修饰的小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）介导的RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术在乳腺癌基因治疗的可行性及特异性。方法设计针对人和鼠VEGFR1基因的siRNA,选用阳离子脂质体Lipofectamine2000TM为转染试剂,将siRNA转染乳腺癌细胞株MCF-7、SHZ-88和SK-BR-3裸鼠移植瘤,体内外诱导RNAi。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖,逆转录聚合酶链反应（reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR）和蛋白印迹试验（western blotting）分别检测体内外siRNA治疗组与对照组VEGFR1基因表达变化。结果体外实验结果显示:靶向VEGFR1基因siRNA转染乳腺癌细胞后,两种细胞增长均明显减慢,细胞增殖均被抑制,人和鼠乳腺癌细胞生长抑制率达50.1%、49.8%;VEGFR1mRNA和蛋白的表达均明显降低（p＜0.05）,VEGFR1 siRNA 50 nmol/L、100 nmol/L和200 nmol/L,3组数据均有统计学意义（P＜0.05）,50 nmol/L与100 nmol/L和200 nmol/L组相比有统计学意义（P＜0.05）,而100 nmol/L和200 nmol/L两组之间比较无统计学意义（P＞0.05）。VEGFR1 siRNA抑制细胞增殖,并且在一定范围内抑制率随着浓度增加而增加,达到一定浓度后,再增加siRNA浓度并不提高沉默作用。裸鼠体内实验结果显示:siRNA治疗组裸鼠生长状态良好,体重稳定,瘤组织的增长受到明显抑制;RT-PCR、蛋白印迹试验的VEGFR1变化与体外试验结果一致。体内外对照组各指标均无显著变化。结论化学修饰的siRNA介导的RNAi在体内外均能成功下调靶基因VEGFR1的表达,抑制乳腺癌细胞增殖,是潜在的肿瘤治疗新方法,而VEGFR1亦可作为肿瘤治疗的新靶点。