前言 艾滋病(AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的免疫缺陷综合征，是目前对人类威胁最大的传染病之一。因HIV侵袭免疫系统，AIDS病人最终多因机会性感染而死亡。结核是HIV感染者和AIDS病人最常见的机会性感染，全球约有1／3的艾滋病病人死于结核。 结核菌素的纯蛋白衍化物(PPD)诱导细胞因子TNF-α和IL-10分泌的作用与结核分支杆菌相似，但水平稍低。Delia Golett和C．J．C．Dehaas的研究发现，PPD和结核分支杆菌能诱导结核菌素试验阳性(PPD(+))者外周血单个核细胞(PBMC)内HIV的复制。体外实验证实，TNF-α能促进单核巨噬细胞和T细胞系内HIV的复制，IL-10能抑制单核巨噬细胞和PBMC内HIV的复制。由于中国人免疫状况与外国人不完全一样，因此有必要研究中国人群中结核对HIV复制的影响；此外，PPD对HIV感染的PBMC分泌细胞因子的作用及其对淋巴细胞内HIV复制的促进作用与细胞因子的关系还不清楚，国外有关研究甚少，国内未见报道。 本研究拟通过体外实验将PPD分别与正常的和HIV-1感染的PBMC共培养来探讨PPD对国人PBMC中HIV-1复制的作用，同时检测PPD(+)者的HIV-1感染和未感染的PBMC分泌TNF-α和IL-10的情况，分析PPD对正常PBMC和HIV-1感染的PBMC分泌细胞因子的影响，从而为AIDS和结核病的预防和治疗提供新思路。 实验材料 PBMC从4份PPD（刁和3份PPD（刁健康人的新鲜抗凝血中提取。HIV－ISF－33毒株由卫生部艾滋病预防与控制中心参比实验室惠赠，实验滴度为125 TCID。／Inl。PPD购自中国药品生物制品检定所。HIV－IP24抗原 EllSA试剂盒为荷兰阿克苏公司产品。IL－10和TNF－a ELISA试剂盒为深圳晶美公司分装美国Ge啊me公司产品。RPMI 1640为GIBCO B既公司产品。 实验方法 l邑PPD对＊V－1复制的作用 密度梯度离心法分离4个PPD（＋）健康人和3个PPD（－）健康人的PBMC，感染HIV－ISF－33株（125 TCID。／IInl）后接种于 48 yL板（终浓度为 IX 10‘细胞／InlX将 PPD按终浓度为 10fig／d和Nd加人实验孔（设立不加”D的阴性对照X培养72 jJ＼时后收上清，测定州抗原含量。 2．PPD对PBMC分泌细胞因子的影响 PPD（＋）健康人的PBMC和PPD共培养72 jJ’时后收上清（设立不加PPD的阴性对照入测定细胞因子TNF－。和IL习 的含量。 3．PPD对＊V－1感染的PBMC分泌细胞因子的影响 HIV叫－33感染的PPD（＋）健康人的PBMC与PPD共培养72小时后收上清（设立不加 PPD的阴性对照人测定细胞因子 TNF－a和 IL—10的含量。 4．统计方法t检验。 ·2· 实验结果 二．PPD对HIyJ复制的促进作用 4个PPD（叫健康人的PBMC启体外感染HIVJ 刁3株 ＊25 hID／lrnl）后，用 PPDO）刺激72小时，HIVJ 的含量比无PPD刺激的阴性对照组明显升高（P＜o．仍＊而在3 个PPD（刁健康人的PBMC，未见到PPD明显提高HIVJ 含 量（P＞o．05）（见图二）。 2．PPD对PBMC分泌细胞因子的影响 将PPD（owtml）与4个PPD（＋）健康人的PBMC共同培养 72小时后发现，与无PPD刺激的阴性对照组相比fPD能显著诱 导细胞因子’YNr－a和IL－ic的分泌（P＜o．05）（见图2）。 3．PPD对H二V－二感染的PBMC分泌细胞因子的影响 一个PPD（＋）健康人的PBMC，在体外感染HIV—ISF—33株 O25冗1礼八）后，用匹D＊ 吵d）刺激72小时，上清中细胞 因子wF－a的含量比无凹D刺激的阴性对照组显著升高（P＜ o．05），IL－10比阴性对照组显著下降（P＜O．05）（见图3）。 讨 论 近些年来，结核病再次成为全球最紧迫的公共卫生问题。我 国现有活动性结核病人500万，其中传染性肺结核病人200万。 HIV感染者和AIDS病人是结核的高发人群，发生结核病的概率 是 IIW（－）PPD（＋）者的 30倍。临床观察和流行病学调查都证 实，活动性结核能加速HIV感染后病程进展，缩短患者生存期。 人体的免疫反应包括天然门特异性）免疫和获得性（特异 ·3·性）免疫。机体对抗原的初次免疫应答需要4－7天。初次免疫应答后，部分效应细胞转变为兔疫记忆细胞，当机体再次遇到相同抗原刺激时，免疫记忆细胞迅速转人活化增殖状态，分化出效应性淋巴细胞，因此，记忆性抗原引起的再次免疫应答比初次兔疫应答更快、更强。此外八6T细胞可能在微生物感染的早期发挥作用。结核分支杆菌刺激机体产生获得性细胞免疫，它是机体抵抗结核杆菌感染的主要防御机制，主要由抗原特异性 CD4叮细胞介导，CDS叮细胞和YST细胞也发挥一定的作用。 HIV是一种逆转录病毒，主要侵袭免疫系统，导致?