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本论文以清开灵注射液中6种活性成分为研究对象,其中包括4种主要活性成分黄芩苷、栀子苷、胆酸和猪去氧胆酸,以及被认为是疑似过敏原的咖啡酰基奎宁酸类化合物中含量较高的绿原酸和新绿原酸,建立了同时测定大鼠血浆中这6种活性成分浓度的含量测定方法,并成功应用于清开灵注射液的药代动力学研究中,且进一步基于其解热作用进行了PK-PD结合模型研究。论文主要研究内容及结果如下：1.建立并验证清开灵注射液中6种活性成分在大鼠血浆中的含量测定方法本研究采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用技术(UPLC-MS/MS)建立了同时测定清开灵注射液中6种活性成分在大鼠血浆中浓度的含量测定方法。采用BEH C18柱(100×2.1mm i.d.,1.7μm)在梯度洗脱程序下,以0.4mL/min的流速对待测成分进行色谱分离,分析时长仅需6min；以电喷雾负离子模式(ES-)电离,多反应监测(MRM)方式进行质谱检测。结果表明,所有化合物的线性关系良好(r>0.9974),日内及日间精密度(相对标准偏差)均小于12.2%,准确度(相对误差)在-9.8-6.3%范围内,各成分的回收率在73.77-105.04%范围内,待测成分及内标基质效应在85.57～106.22%范围内,不影响准确定量。此法简单,快速,灵敏度高。2.清开灵注射液给予腹腔注射后在正常及发热模型大鼠体内药代动力学行为比较研究本章将建立的UPLC-MS/MS法成功应用于清开灵注射液的药代动力学研究中,比较了正常及酵母致热模型大鼠体内6种活性成分的药代动力学行为。以PhoenixWinNonlin Ver.6.2.×&6.3软件计算药代动力学参数,以SPSS17.0软件进行统计学分析。结果表明,黄芩苷在发热组大鼠体内的最大血药浓度值(Cmax)和药时曲线下面积(AUC)均显著高于正常组,栀子苷在发热组大鼠体内的Cmax显著高于正常组,而另外4种成分在两组大鼠体内的药代动力学参数均无显著性差异。因此,认为黄芩苷和栀子苷可能是清开灵注射液解热作用的潜在标记物。3.基于清开灵注射液解热作用的PK-PD模型研究本章以清开灵注射液中黄芩苷和栀子苷在酵母致热大鼠体内的血药浓度为药动学指标,以发热大鼠体温下降值为药效指标,以WinNonlin软件建立了清开灵注射液的药代动力学-药效动力学(PK-PD)结合模型,成功阐明了清开灵注射液解热作用滞后于药物血药浓度的现象。结果表明黄芩苷和栀子苷均以效应室联接的有滞后时间二房室一Sigmoid Emax模型拟合较优,黄芩苷和栀子苷的Emax(最大效应)值分别为1.31℃和1.23℃,约为模型对照组大鼠体温升高最大值(1.38℃)的94.9%和89.1%,说明清开灵注射液具有明显的解热作用,黄芩苷和栀子苷的EC50/Cmax(达Emax/2时血药浓度/最大血药浓度)值分别为18.5%和15.5%,表明黄芩苷和栀子苷由中央室转移至效应室的量较少,另外,黄芩苷和栀子苷的γ值分别为2.03和2.08,说明清开灵注射液的安全范围较窄。