长链非编码NRON通过自噬通路调控肉鸡脂肪生成的研究

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:neppat8
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长链非编码RNA NRON(ncRNA repressor of the nuclear factor of activated T cells)是活化T细胞核因子NFAT(nuclear factor of activated T cells)的非编码RNA抑制物。近年来的研究发现NRON及NFAT,除了与心肌、骨骼肌发育相关,而且同脂肪细胞分化也有关系。此外,NFAT蛋白活性激活有赖于钙/钙调蛋白依赖的磷酸酶和钙调磷酸酶(calcineurin,Cn)通路,并且钙调磷酸酶参与调节NFAT的脱磷酸化,影响NRON与NFAT通过RNA-蛋白复合物的形式来发挥作用;同时,此钙调信号通路可以调节溶酶体形成,影响自噬体行使降解功能。由此可见,长链非编码RNA NRON可能通过自噬通路来调控肉鸡脂肪生成。本研究以东北农业大学肉鸡腹脂双向选择系为材料,使用肉鸡各部分组织及前脂肪细胞,并通过基础的分子生物学实验(Real-time RT-PCR、Western Blot、细胞培养、PCRRFLP技术等),初步探讨NRON与肉鸡脂肪生成间的关系。主要研究结果如下:(1)基于高、低脂系鸡基因组重测序结果,在NRON基因上检测到并验证了多个SNP位点。RFLP检测分析NRON基因SNP位点多态性,发现NRON与心脏重性状显著相关(P<0.05);(2)在七周龄肉鸡不同组织中检测NRON基因表达规律,发现NRON基因在心脏、腺胃、胸肌中表达差异极显著(P<0.01)。检测不同周龄的鸡腹部脂肪组织的基因表达规律,发现NRON基因和NFAT基因在高、低脂系中表达水平均差异显著(P<0.05);(3)在原代前脂肪细胞和永生化前脂肪细胞系中,检测NRON和NFAT基因的表达规律,发现在永生化前脂肪细胞系中NRON表达差异不显著,但NRON和NFAT呈逐渐上升趋势;在原代前脂肪细胞中NRON表达趋势与PPARγ一致。(4)在原代前脂肪细胞和永生化前脂肪细胞系中进行油酸诱导分化,分别对NFAT脱磷酸化重要因子钙调磷酸酶进行抑制,结果发现促进脂肪细胞分化;(5)检测不同周龄鸡腹部脂肪组织及前脂肪细胞中自噬相关基因BECN1和ATG5的mRNA水平表达规律和蛋白水平表达规律,发现BECN1基因在高、低脂系中表达存在差异。综上所述,本研究发现NRON同肉鸡心脏和肌肉生长发育有关,而且可能参与调控脂肪生成过程。NRON如何参与自噬通路并调控脂肪生成的具体分子机制,有待进一步研究。
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