论文部分内容阅读
目的:本研究以传统的髓海理论和成年神经干细胞增殖分化理论为基础,探讨针刺、艾灸对快速老化小鼠(SAMP8)脑内神经干细胞增殖分化的影响,从“补髓”的角度,通过严谨的实验研究,揭示髓海理论针灸效应的现代科学基础,为髓海理论针灸效应的现代科学阐释提供新的研究思路。方法:以SAMP8小鼠作为模型动物,随机分为模型组、针刺组、艾灸组,以SAMR1小鼠作为正常对照组。针刺组、艾灸组根据“补髓益脑”的治疗原则,选用“百会”穴进行治疗。操作方法为针刺组向前平刺约2mm,行捻转手法操作约10s,频率约150次/min,每隔5min行针一次,留针期间小鼠在笼里自由活动,共治疗20min;艾灸组用镊子持艾炷放在穴位上,用线香点燃,勿吹,待其自然熄灭后,再燃另一炷,共燃三炷。两组均每天治疗一次,7天为1疗程,共治疗3个疗程。正常组和模型组每天在相同的时间给予相同方式的抓取。处死前一周开始给予小鼠50mg/kg的BrdU腹腔注射,治疗结束后,选取海马、嗅球、皮层脑组织,用免疫组化方法和免疫荧光双标方法检测神经干细胞增殖、分化;用Tunel/免疫荧光法检测神经干细胞的凋亡。结果:(1)增殖各组小鼠海马、嗅球、皮层都有BrdU、BrdU/Nestin、ki-67/Nestin阳性细胞表达,提示各组小鼠均存在神经干细胞增殖。与正常组相比,模型组阳性细胞数较少(P<0.05);与模型组相比,针刺组和艾灸组阳性细胞数较多(P<0.05),但少于正常组(P<0.05);针刺组和艾灸相比较无差异(P>0.05)。(2)分化各组小鼠海马、嗅球、皮层均有BrdU和神经元/神经胶质细胞阳性标志物的共表达,提示各组小鼠均存在神经干细胞分化。与正常组相比,模型组神经干细胞分化为神经元的阳性细胞数较少(P<0.05),分化为星形胶质细胞和少突胶质细胞的阳性细胞数较多(P<0.05);与模型组相比,针刺组和艾灸组神经干细胞分化为神经元阳性细胞数较多(P<0.05),分化为星形胶质细胞和少突胶质细胞较多(P<0.05),接近正常组或略有差异(P<0.05或P>0.05);针刺组与艾灸组相比较无差异(P>0.05)。(3)凋亡各组小鼠海马、嗅球、皮层均有Tunel/Nestin阳性细胞表达,提示各组小鼠均存在神经干细胞凋亡。与正常组相比,模型组Tunel/Nestin阳性细胞增加(P<0.05);与模型组相比,针刺组和艾灸组Tunel/Nestin阳性细胞数减少(P<0.05),接近正常组(P>0.05);针刺组和艾灸组相比较无差异(P>0.05)。结论:(1)针刺、艾灸可以促进并诱导SAMP8小鼠海马、嗅球、皮层神经干细胞的增殖和分化。(2)针刺和艾灸可以抑制SAMP8小鼠海马、嗅球、皮层神经干细胞的凋亡。(3)针灸补髓对SAMP8的治疗效应可能与针刺、艾灸影响内源性神经干细胞的增殖分化有关。