研究目的弥漫大B细胞淋巴瘤是最常见的非霍奇金淋巴瘤。利妥昔单抗联合环磷酰胺、阿霉素、长春新碱、强的松是弥漫大B细胞淋巴瘤患者的标准治疗方案,尽管这种方案极大的延长了患者的生存时间,但仍有30%-40%的患者会出现疾病的复发或者进展。多种因素可导致疾病复发或进展,阿霉素的心脏毒性导致患者难以很好耐受并完成标准化疗方案是一主要因素。阿霉素的心脏毒性主要与其本身无靶向性、亲心肌特性而大量聚集于心肌组织和细胞有关。一体化诊疗可以同时实现疾病的诊断和治疗,可以依据精确的诊断信息实施定点治疗。近年来,载药微泡和超声技术的联合使用为肿瘤的一体化诊疗提供新手段。低频超声可对载药微泡在体内的传输进行示踪,高频超声波可使微泡破裂从而定点可控地释放药物到肿瘤组织,从而降低对其他非靶组织的毒副作用。因此,本研究拟构建一种基于载药微泡超声介导的药物靶向释放系统,实现弥漫大B淋巴瘤的一体化诊疗,从而实现阿霉素的靶向定点释放,降低阿霉素心脏毒性,为改善弥漫大B细胞淋巴瘤患者的临床获益提供新思路和新方法。研究方法1.利用机械搅拌法、生物素-链霉亲和素法制备靶向CD20载阿霉素微泡;继而对微泡一般特征进行观察和评估。2.体外研究不同浓度微泡溶液的超声回声强度;在荷弥漫大B细胞淋巴瘤小鼠模型中,观察微泡注入后肿瘤局部超声成像。3.研究靶向CD20载阿霉素微泡对弥漫大B细胞淋巴瘤的体内外抗肿瘤作用。研究结果1.靶向CD20载阿霉素微泡呈球形,分散性好,粒径大小约为615.9±206.8 nm,Zeta电位为-28.3±11.9 mV;载药率和包封率分别为(6.22±0.12)%和(55.2±2.05)%;超声可以有效介导阿霉素的释放。2.体外实验中显示不同浓度的微泡超声回声强度不同;动物实验中显示微泡到达小鼠皮下瘤体的时间、超声回声强度达峰值的时间以及超声增强持续的时间分别是1.45±0.1s、11.88±0.65 s和70.27±2.05 s。3.靶向CD20载阿霉素微泡可明显抑制SU-DHL-4细胞的增殖;通过上调BAX/BCL-2比例,增强Caspase-3蛋白活性从而启动线粒体凋亡途径诱导SU-DHL-4细胞凋亡。动物实验中,靶向CD20载阿霉素微泡联合超声可有效抑制小鼠瘤体生长。研究结论靶向CD20微泡是理想的阿霉素靶向运输纳米载体,为降低阿霉素的心脏毒性提供新方法,同时为实现弥漫大B细胞淋巴瘤的一体化诊疗提供新策略。