微囊藻毒素对动植物的生物学效应及微囊藻的生态控制研究

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本研究利用滇池蓝藻水华提取液探讨了微囊藻毒素对ICR鼠超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和乳酸脱氢酶(LDH)的剂量和时间影响效应。HPLC分析结果表明该水华提取液中含有3种微囊藻毒素:MC-RR、-LR和-YR,分别占62%、35%和3%。以半致死剂量(LD50,83mg/kg体重)腹腔注射水华提取液1h后,ICR鼠的肝重与体重比值显著地高于对照,随着注射剂量的增加,肝重与体重比值逐渐增加,肝脏的GSH-Px活性逐渐增强,而SOD和LDH活性却呈下降趋势;1倍LD50的剂量注射ICR鼠30min后,其GSH-Px活性即显著高于对照,而且2h内其差异均达显著性水平。 利用不同浓度的滇池蓝藻水华提取液,在国内外首次探讨了微囊藻毒素对水稻(OryzasativaL.)、油菜(BrassicanapusL.)和苹果(Maluspumila)的生长抑制效应及其机制,以及微囊藻毒素在水稻、油菜和苹果组培苗中的积累。低浓度的微囊藻毒素可以诱导苹果叶片、叶柄、茎段脱分化产生愈伤组织,然而,微囊藻毒素明显地抑制了水稻、油菜和苹果组培苗的生长发育。水稻和油菜对微囊藻毒素的敏感程度存在差异,0.6μg/ml的微囊藻毒素显著抑制了油菜种子的发芽,浓度达3μg/ml时无正常油菜苗发生,其种子发芽率为0;浓度高于0.12μg/ml的微囊藻毒素显著抑制了油菜幼苗的生长,其苗高显著低于对照;不同浓度的微囊藻毒素处理后,油菜幼苗还表现为不同程度的黄化和坏死。虽然微囊藻毒素处理后,水稻的发芽率并无显著差异,但当毒素浓度达1.5μg/ml时,水稻的生长发育显著被抑制。水稻和油菜种子暴露于微囊藻毒素中的另一重要生物学效应是幼苗根系受到显著抑制,3μg/ml微囊藻毒素导致96%的水稻幼苗主根坏死。SOD和过氧化物酶(POD)酶活性分析表明微囊藻毒素影响了植物体内活性氧代谢系统的平衡,自然生态系统中的微囊藻毒素可成为植物生长的一种逆境。琼脂糖凝胶电泳和DNA的荧光定量测定结果显示微囊藻毒素可引起水稻DNA损伤,并首次利用RAPD技术研究了微囊藻毒素引起的油菜遗传变异,RAPD分析表明利用随机引物F03和S01进行PCR扩增油菜基因组DNA后,发现至少有3条以上的多态性条带,这些多态性条带可能与微囊藻毒素引起的基因组DNA变异有关。ELISA分析表明微囊藻毒素可在水稻、油菜和苹果体内积累,处理浓度愈高,积累量愈大,因此,微囊藻毒素也可能通过植物媒介而对人类健康产生潜在的危害。水稻和油菜幼苗内积累的微囊藻毒素存在着显著差异,表明两者可能具有不同的抵抗微囊藻毒素的生理机制。 为了寻求一种安全、经济而高效的控制有毒微囊藻的方法,在国内外首次探讨了芦柑皮和香蕉皮对微囊藻生长的影响。试验发现0.1%的芦柑皮提取液显著地抑制了铜绿微囊藻的生长,当芦柑皮提取液的浓度达到0.5%时,几乎检测不到微囊藻的生长;当香蕉皮提取液的浓度达到0.5%时,也能显著地抑制微囊藻的生长,结果表明芦柑皮比香蕉皮具有较强的抑藻活性;不经任何处理的芦柑皮和香蕉皮同样能显著地抑制微囊藻的生长;研究分析表明芦柑皮和香蕉皮可能会成为控制微囊藻水华的天然物质。 另外,利用层析柱中的固化微囊藻研究了铜绿微囊藻从水溶液中去除pb2+、Cd2+和Hg2+的潜力。微囊藻对三种重金属显示了较高的亲和力,在平衡状态下,对Cd2+和Hg2+的去除效率为90%,pb2+为80%。二元和三元混合体系的竞争性富集试验表明溶液中的pb2+能被微囊藻优先富集,Cd2+的存在低水平地干扰了Hg2+的富集,这种影响正如pb2+和Hg2+对Cd2+一样,然而,Hg2+的富集很大程度上被Pb2+所抑制。用lMHCl可在25分钟内完全洗脱pb2+、Cd2+和Hg2+。研究结果表明,微囊藻可能成为一种去除重金属离子的潜在生物材料。
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