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目的：研究N-cad在肝癌中的表达情况及与临床病理特征、术后生存的关系方法：收集手术切除的肝癌及癌旁组织64例标本以及血管瘤病人手术切除的正常肝组织5例,免疫组化及蛋白印记检测N-cad在肝癌,癌旁及正常肝组织中的表达；回顾性分析N-cad的表达与临床病理特征的关系；术后病人随访,做生存分析。结果：N-cadherin在正常肝组织及癌旁组织中呈均一膜表达,而在肝癌组织表达缺失,缺失率达53%(34/64)。64例肝癌中,低分化肝癌有33例,N-cad表达缺失的25例,占76%；中度分化的肝癌19例,N-cad缺失的有6例,占32%,高分化的肝癌有12例,缺失的有3例,占25%,有显著性差异(P<0.01)；N-cad在伴有门脉癌栓或血管侵犯的肝癌中缺失率高达92%(11/12),有显著性差异(P＜0.01)。N-cad缺失表达与病人年龄、肝硬化、肿瘤大小等无关。此外,N-cad缺失表达组的肝癌术后病人的无瘤生存率较N-cad表达组低(P<0.05),而缺失表达组与表达组总生存率无显著性差异(P=0.108)结论：N-cad在肝癌中表达缺失,且与肿瘤分化以及血管侵袭转移相关；N-cad缺失表达的肝癌病人术后无瘤生存率较N-cad表达组低。目的：体外研究N-cad对肝癌细胞HCCLM3增殖、粘附及侵袭转移的影响方法：利用RNA干扰技术敲减肝癌细胞HCCLM3中N-cad的表达,建立稳定敲减N-cad的细胞株；利用细胞计数检测N-cad对细胞增殖的影响,利用细胞间聚集实验检测N-cad对细胞间粘附的影响,利用Transwell系统检测N-cad对细胞侵袭转移的影响结果：成功建立了稳定敲减N-cad的细胞株,其中Ncad1, N-cad2和N-cad7, N-cad9细胞克隆中N-cad的表达明显减低,而对照组eGFP1, eGFP2以及HCCLM3细胞中N-cad表达没有减低。敲减N-cad后HCCLM3细胞增殖没有变化。细胞聚集实验表明,在敲减的细胞克隆N-cad2, N-cad7中,成团细胞较对照组eGFP1减少；对照组eGFP1的聚集指数为11%,而N-cad2, N-cad7细胞聚集指数分别增加到24%和27%,实验组与对照组相比,有统计学差异(P<0.01),而而N-cad2与N-cad7之间没有统计学差异。细胞迁移侵袭实验结果表明,实验组N-cad2、N-cad7穿膜或铺1natrigel的细胞较对照组eGFP1明显增多,有统计学差异P<0.01,而两实验组没有差异。结论：敲减N-cad表达减弱细胞间粘附作用,增强了细胞的侵袭转移能力目的：研究探讨敲减N-cad促进肝癌细胞侵袭转移的分子机制。方法：免疫荧光和western blot检测敲减N-cad细胞克隆中β-catenin的表达,检测Wnt/β-catenin的靶基因cyclin D1表达,同时在肝癌组织中检测N-cad及β-catenin表达,分析两者表达的关系。结果：在敲减N-cad表达的细胞克隆N-cad2, N-cad7中,细胞核没有β-catenin聚集；与对照组细胞相比,细胞膜上的β-catenin的表达减弱；western blot结果发现,总的β-catenin蛋白在细胞克隆N-cad2, N-cad7中表达减低,而cyclin D1表达没有改变。在肝癌组织中,当N-cad表达缺失时,细胞膜上β-catenin表达也减弱。结论：敲减N-cad表达后,Wnt/β-catenin途径没有激活,其促进细胞侵袭转移的具有分子机制仍需进一步研究；细胞粘附作用减弱可能起部分作用。目的：建立肝癌肺转移模型,为后续动物实验奠定基础方法：5×106/200μLHCCLM3细胞接种裸鼠皮下,监测肿瘤的生长；待肿瘤直径为1cm时,取下肿瘤,剪成大小为1×1×1mm3组织块,在新的裸鼠上进行肝内瘤组织块原位接种；不同时间点解剖裸鼠,进行HE染色,镜下观察转移灶结果：皮下接种10天左右,可触及肿瘤；2周左右,肿瘤直径可达1cm左右。肝内接种术后第35天,解剖发现接种部位均形成肿瘤,未发现肺转移灶；在术后42天及术后60天,肝脏接种部位已形成巨大肿瘤,肺上小的出血点,经HE染色证实为肝癌肺转移灶。结论：瘤组织肝内原位接种42天后发生肺转移