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目的研究评估不同剂量乌司他丁(UTI)对爆炸致家兔急性肺损伤(ALI)的作用及其机制。方法建立爆炸致家兔急性肺损伤模型。选择家兔40只,随机分为5组：正常对照组(N)、ALI组(I)和UTI低剂量组(L)、UTI中剂量组(M)、UTI高剂量组(H),每组8只,放入空中爆炸场中,由专业人员实施爆炸,爆炸后爆炸场内立即进行排风换气,迅速取出实验样本至通风环境下,并实施临时简单的抢救。建立家兔ALI动物模型后,UTI低、中、高剂量组分别注射(2.5、5、10×104U/kg)UTI溶液,N组、I组注射等量生理盐水。4h采集静脉血液,24 h结束实验,24 h采集支气管肺泡灌洗液(BALF)、血液及肺组织标本。观察各组家兔实验前后的呼吸、摄食、精神状态及活动情况,并测定肺湿干重比(W/D),ELISA方法检定BALF及血清中TNF-α、IL-6、IL-10的含量,蛋白印迹法测定肺组织NF-κB蛋白和MMP-9蛋白mRNA的表达水平,RT-PCR方法测定肺组织NF-κB mRNA和MMP-9 mRNA的表达水平,光镜下观察肺HE切片病理学变化。结果1、各组家兔的一般表现：爆炸前,动物呼吸平稳,各组家兔活动正常。爆炸后,I组动物口唇、耳部皮肤等相继出现发绀,呼吸频率加快,部分动物口腔或鼻腔出现泡沫状分泌物,伴呼吸窘迫、烦躁不安等症状,肺部出现干、湿性罗音,部分动物甚至出现短暂昏迷,提示爆炸致伤后家兔出现呼吸功能不全。2、肺组织湿干重比(W/D)：I、H、M、L组的肺湿干重比(W/D)显著高于N组(均P<0.05)； H、M、L组与I组比较,H、 M、L组有显著性降低,且以H组降低最显著(均P<0.05)。3、支气管肺泡灌洗液TNF-α:I、H、M、L组与N组比较,支气管肺泡灌洗液TNF-α含量显著增高(P<0.05),H、M、L组与工组比较TNF-α含量有所降低(P<0.05),H组与I、M、L组比较肺泡灌洗液中TNF-α含量明显下降(P<0.05),但M组与L组相比,TNF-α含量有所降低,但统计学无差异(P>0.05)。4、支气管肺泡灌洗液IL-6:I、H、M、L组与N组比较,IL-6含量显著增高(P<0.05),H、M、L组与I组比较IL-6含量有所降低(P<0.05),其中H组含量变化最显著(P<0.05)。5、支气管肺泡灌洗液IL-10:H、M、L组与Ⅰ组比较,IL-10含量明显升高(P<0.05),其中H组与M、L组相比,IL-10含量明显升高(P<0.05)。6、4h血清中TNF-α、IL-6:Ⅰ、H、M、L组与N组比较,TNF-α、IL-6含量显著增高(P<0.05),H、M、L组与Ⅰ组比较,TNF-α、IL-6含量有所降低(P<0.05),其中H组含量变化最显著(P<0.05)。7、24h血清中TNF-α、IL-6:I、H、M、L组与N组比较,TNF-α、IL-6含量显著增高(P<0.05),H、M、L组与Ⅰ组比较,TNF-α、IL-6含量有所降低(P<0.05),H组与M、L组比较,TNF-α、IL-6含量降低明显(P<0.05)。8、4h与24h血清中IL-10:H、M、L组与Ⅰ组比较,IL-10含量明显升高(均P<0.05),其中H组与M、L组相比,IL-10的含量显著升高(均P<0.05),但M组与L组相比,IL-10含量均有升高,但统计学无差异(均P>0.05)。9、肺组织MMP-9蛋白肺组织中MMP-9蛋白:Ⅰ组高表达,且随UTI量增多,MMP-9蛋白表达水平逐渐降低。10、肺组织MMP-9 mRNA方差分析结果显示MMP-9 mRNA表达水平差异有统计学差异,与N组比较,Ⅰ组高表达(P<0.01),H、M、L组均较Ⅰ组表达水平显著降低(P<0.01)。11、肺组织NF-κB:Ⅰ组表达最明显,且随UTI剂量增大,H、M、L组的蛋白表达逐渐降低12、肺组织NF-κB mRNA:肺组织中NF-κB mRNA表达水平随UTI量的增多,逐渐降低,而Ⅰ组表达量最多(P<0.01)。13、肺组织肉眼观：N组肺表面呈均匀淡粉色,包膜弹性佳,肺表面未见明显破损,切面无液体溢出。Ⅰ组肺组织呈暗红色,可见广泛出血灶,肺体积增大显著,切面有粉红色泡沫状液体溢出。L组与Ⅰ组相似,M、H组肺呈暗红色,包膜下充血水肿相对轻,体积较Ⅰ组缩小。14、肺组织病理切片：Ⅰ组肺组织结构受损,肺泡大小不一,肺泡间隔增厚,可见肺不张及代偿性肺气肿,肺泡腔内出血,可见大量炎细胞浸润,肺间质存有大量水肿液,偶有透明膜形成；L组肺组织结构及功能损伤同样明显,M、H组损伤较Ⅰ组减轻,以H组最为显著,肺间质充血水肿明显吸收；N组为正常肺组织,结构基本正常。结论1、本课题中家兔置于空中爆炸场内实施爆炸后,成功制作ALI的动物实验模型。2、高剂量乌司他丁可明显减轻爆炸致ALI家兔的肺部炎性反应,降低肺内蛋白渗出,减轻肺水肿,而中、低剂量作用相对不明显。乌司他丁能减轻肺损伤的作用机制可能跟抑制NF-κB信号通路的调节,降低MMP-9的表达,以及阻断TNF-α、IL-6等炎性介质的表达与释放,增加IL-10的表达有关。3、乌司他丁可能成为一个潜在的治疗ALI的药物。