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目的探讨人参皂苷CK(Ginsenoside CK)通过TGF-β1/Smads通路诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其作用机制,为人参皂苷CK治疗肝癌的研究提供理论依据。方法常规培养人肝癌SMMC-7721细胞,分为对照组和实验组;利用MTT法检测不同浓度人参皂苷CK(20,40,60,80 μmol/L)作用于细胞的存活率;利用Hoechst染色和流式细胞术检测不同浓度人参皂苷CK(20,40,60 μmol/L)对人肝癌SMMC-7721的凋亡作用;利用免疫细胞化学染色法检测TGF-β1/Smads通路相关蛋白TβRⅡ、Smad4的表达;进一步利用Western Blot技术检测TGF-β1/Smads 通路相关蛋白 TGF-β1、TβRⅡ、Smad2/3、Smad4、Smad7 及凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3的表达;利用Western Blot技术检测加入人重组蛋白TGF-β1后,人参皂苷CK组的TGF-β1/Smads通路相关蛋白Smad2/3、Smad4和Smad7蛋白的表达。结果1.人参皂苷CK能降低人肝癌SMMC-7721细胞存活率,并且随着药物浓度和作用时间的增加,抑制增殖作用明显,且呈一定的时间和浓度依赖性,计算药物作用48h后对SMMC-7721细胞的存活率(%)分别为88.0±8.1,57.0±6.6,34.2±5.6,10.0±5.9;2.人参皂苷CK作用后,Hoechst荧光染色法检测人肝癌SMMC-7721细胞出现大量蓝白荧光深色细胞,发生凋亡,Western blot检测凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3表达显著升高;3.流式细胞术检测,人参皂苷CK(20,40,60 μmol/L)对人肝癌SMMC-7721细胞的凋亡率(%)分别为 7.2±1.2、23.5±2.1、46.2±1.2;4.免疫细胞化学染色检测,人参皂苷CK作用后,随着药物浓度的增加Smad4表达升高;5.Western Blot 结果显示,对照组细胞 TGF-β1、TβRⅡ、Smad2/3、Smad4表达水平较高,Smad7表达水平较低,随着药物作用浓度的增加,TGF-β 1、TβR Ⅱ、Smad2/3、Smad4表达量逐渐降低,而Smad7的表达量逐渐升高;加入人重组蛋白TGF-β1(10 ng/ml)作用后,与人参皂苷CK(60μmol/L)组比较,TGF-β1+人参皂苷CK组的Smad2/3和Smad4表达上升,Smad7表达下降;结论人参皂苷CK可以诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡;TGF-β1/Smads通路途径可能是其诱导细胞凋亡的作用机制之一。