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目的研究寻常型银屑病皮损中miR-210表达变化；预测及验证miR-210的靶基因；研究寻常型银屑病皮损中靶基因RUNX3蛋白表达变化；研究抑制miR-210表达对HacaT细胞RUNX3蛋白的表达、细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响。方法取20例寻常型银屑病患者皮损和16例正常对照者皮肤组织,用TRIzol试剂提取总RNA,用蛋白质抽屉试剂盒提取总蛋白,应用Real-time PCR法对20例寻常型银屑病患者和16例正常对照检测miR-210的表达水平,应用western blot(?)检测蛋白表达水平。运用Mirbase/Targetscans/PicTar等靶基因预测软件查找miR-210可能的靶基因,筛选出与寻常型银屑病发病过程密切相关的基因作为候选靶基因,我们选定RUNX3为靶基因。构建RUNX3野生型(RUNX3WT-luciferase)和突变型(RUNX3Mut-luciferase)荧光素酶报告基因,与miR-210模拟物(miR-210mimic)和阴性对照(mimic control)用脂质体共转染至HacaT细胞,转染48小时后收集细胞,运用双荧光素酶报告基因检测系统,以海肾荧光素酶作为内参照,检测萤火虫荧光素酶的活性,在HacaT细胞中验证miR-210是否调控RUNX3表达。使用miR-210抑制物(miR-210inhibitor)和阴性对照(miR-210inhibitor control),脂质体法转染HacaT细胞,采用Real-time PCR法检测转染后miR-210的表达,采用Western blot法检测RUNX3蛋白表达水平,MTT法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果1.Real-time PCR结果显示：miR-210在寻常型银屑病患者组皮损中表达较正常对照组显著降低(p<0.05)。western blot检测结果显示：相对于正常对照组,寻常型银屑病组皮损中RUNX3的蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。寻常型银屑病皮损中miR-210表达水平与RUNX3蛋白表达水平呈显著负相关(r=-0.849,p=0.002)。2.在HacaT细胞中共转染]miR-210mimic或miR-210mimic control与RUNX3基因3’-UTR野生型报告载体(RUNX3WT-luciferase)或突变型报告载体(RUNX3Mut-luciferase),荧光素酶报告基因检测显示：与共转染miR-210mimic control和RUNX3WT-luciferase组相比,共转染miR-210mimic和RUNX3WT-luciferase组荧光素酶活性被显著抑制(p<0.05),而当RUNX3-3’-UTR突变修饰后(RUNX3Mut-luciferase),荧光素酶活性无显著改变(P>0.05)。3.转染miR-210inhibitor的HacaT细胞相对于转染miR-210inibitor control组miR-210表达水平降低,RUNX3蛋白表达水平升高,差异均有显著统计学意义(P<0.05),细胞增殖活力明显增加,凋亡水平下降,差异有统计学意义(P<0.05),细胞周期各期无明显统计学意义(P>0.05)。结论1.寻常型银屑病患者皮损中miR-210表达降低。2.RUNX3为miR-210的靶基因,miR-210通过作用于RUNX33’-UTR区抑制报告基因表达,miR-210通过与靶基因RUNX3结合影响RUNX3蛋白表达水平。3.HacaT细胞中miR-210表达水平降低导致细胞活力增加,凋亡减少,细胞周期无改变。