枫香叶抗氧化活性成分分离及其对江安李保鲜作用研究

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枫香(Liquidambar formosana)是一种具有综合开发潜质的树种,不仅是良好的用材还具有园林绿化用途,其副产品树叶、树皮、果序和树脂均有药用价值。枫香中许多成分均具有较强的抗氧化活性,是人类生活、生产中不可缺少的重要物质,具有极高的开发利用价值。因此,进行枫香次生抗氧化活性单体物质的追踪,对枫香次生物质的开发利用至关重要。本研究针对枫香次生抗氧化活性单体追踪及对果品保鲜作用机制研究的不足,以枫香叶提取物为研究对象,采用超声波提取技术对枫香次生代谢物进行提取,采用响应面法对枫香叶抗氧化活性成分总黄酮提取工艺进行优化,采用柱层析技术分离纯化枫香次生抗氧化活性单体,采用色谱和质谱技术鉴定枫香次生抗氧化活性单体化学结构;通过测定江安李贮藏期间果实品质及生理指标的变化,探讨枫香叶次生活性成分对江安李的保鲜作用,并揭示其保鲜作用机理。通过本研究得到以下结论:1.运用超声波辅助提取技术提取枫香叶总黄酮,利用响应面法优化枫香叶总黄酮的最佳提取工艺,并研究枫香叶总黄酮对DPPH·、O2-·和·OH等的清除能力。结果显示,枫香叶总黄酮的最优提取工艺参数为:液料比为40.1mL·g-1,乙醇体积分数为68.7%,超声温度为73℃,超声时间为93.5min,在此工艺下枫香叶总黄酮得率为27.6083mg·g-1;枫香叶总黄酮清除DPPH·、O2-·和·OH的ECso分别为0.0906mg/mL、0.0593mg/mL和0.4891mg/mL,与Vc相比,清除O2-·和·OH的ECso分别是Vc的1.4倍和2.2倍,虽然枫香叶总黄酮对DPPH·、O2-·和·OH三种自由基的清除能力要弱于Vc,但是香叶总黄酮仍然表现出较高的体外清除自由基的活性。2.以枫香叶为原料,将枫香叶醇提物依次通过石油醚相,氯仿相,乙酸乙酯相,正丁醇相和水相进行萃取,研究不同极性萃取成分的总还原能力及对DPPH·、O2-·和·OH的清除效果。结果显示,在体外清除自由基的试验中,除O2-·的清除率略低于正丁醇相外,其余清除自由基和总还原能力的测定中都表现了相近的趋势:VC>乙酸乙酯相>正丁醇相>BHT>氯仿相。说明枫香叶醇提物中乙酸乙酯相具有很强的抗氧化活性和清除自由基能力,抗氧化物质主要存在于弱极性的乙酸乙酯相中。3.运用柱层析、薄层色谱、重结晶技术分离纯化枫香叶次生抗氧化活性单体,运用高效液相色谱和质谱等技术对枫香叶抗氧化活性单体进行鉴定,并研究分离纯化后的活性单体对DPPH·的清除作用。结果显示,从乙酸乙酯相中分离出两种单体,经过结构鉴定分别为芸香叶苷和紫云英苷;通过抗氧化活性检测,发现二者均有较强的清除自由基能力,在质量浓度为10-50μg/mL时,芸香叶苷的清除DPPH·作用强于紫云英苷。4.采用不同质量浓度(8mg/100mL和15mg/100mL)的枫香叶乙酸乙酯萃取液对江安李果实进行浸泡处理并低温贮藏(6℃),测定贮藏期间李果实的腐烂指数、可溶性固形物、可滴定酸、硬度、细胞膜渗透性、MDA含量和POD活性等品质和生理指标的变化。结果显示:用枫香叶乙酸乙酯萃取液处理可以有效保持李果实的贮藏品质,明显抑制李果实可溶性固形物、可滴定酸含量、相对固/酸比值(SSC/TA)和硬度的下降速率,有效的控制李果实腐烂指数、细胞膜渗透性、MDA含量和POD活性的升高,较好的保持细胞膜功能活性。李果实贮藏25d后,各测试指标在处理与对照之间均具有显著差异(P<0.05)。
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