【摘 要】
：
目的:慢性肾脏病（CKD）是一种由多种原因造成的肾脏损害的疾病,肾纤维化（RF）是其发生发展过程中的关键病理过程,肾小管上皮细胞铁死亡可促进RF的发生发展。芒柄花素（FN）是存在于中药黄芪的一种应用广泛的值得开发的单体成分,已经有研究表明,FN可以抑制Smad3的表达,而ATF3与Smad3有直接相互结合关系并且被发现能抑制SLC7A11的表达,因此,从靶向Smad3出发治疗铁死亡相关RF成为新的
论文部分内容阅读
目的:慢性肾脏病（CKD）是一种由多种原因造成的肾脏损害的疾病,肾纤维化（RF）是其发生发展过程中的关键病理过程,肾小管上皮细胞铁死亡可促进RF的发生发展。芒柄花素（FN）是存在于中药黄芪的一种应用广泛的值得开发的单体成分,已经有研究表明,FN可以抑制Smad3的表达,而ATF3与Smad3有直接相互结合关系并且被发现能抑制SLC7A11的表达,因此,从靶向Smad3出发治疗铁死亡相关RF成为新的治疗策略。本研究拟从铁死亡-RF进程角度探讨中药小分子单体FN在改善慢性肾脏病中的作用及其通过Smad3/ATF3/SLC7A11信号通路的调节机理。方法:1)体内实验:构建叶酸（FA）型肾病及单侧输尿管梗阻（UUO）小鼠梗阻性肾病的CKD模型,FN（40 mg/kg）以及阳性对照药物血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦（VST,20 mg/kg）灌胃干预,FA模型验证组分组为:Vehicle组,FA组,FA+FN组,FA+VST组;UUO模型验证组分为:Sham组,UUO组,UUO+FN组,UUO+VST组。检测血清中的肌酐在不同组中的含量和尿素氮的水平评估药物对肾功能的影响,HE染色观察肾小管扩张程度,计算损伤评分。谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）以及组织铁的含量反应铁死亡水平,同时检测铁死亡标志物胱氨酸/谷氨酸转运体系统Xc-（x CT,也称为SLC7A11）和谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）的表达、氧化应激水平（Keap1,Nrf2和4-HNE）、纤维化程度（Masson染色,ɑ-SMA,fibronectin和Col1a1）的影响;蛋白水平评估FN药物干预对Smad3和ATF3活化的影响。2)体外实验:通过检测FN不同药物浓度处理p TECs的吸光度计算出细胞存活率而筛选出芒柄花素对细胞没有伤害的适宜浓度,铁死亡激动剂RSL3/erastin处理原代肾小管上皮细胞诱导肾脏铁死亡发生,并在不同浓度FN（20-80μM）的作用下,检测铁死亡水平（GSH、MDA、组织铁含量、铁死亡标志物SLC7A11和GPX4、脂质过氧化程度、细胞内铁含量）、纤维化程度（ɑ-SMA,fibronectin和Col1a1）的改变;胞质、核分离提取蛋白检测芒柄花素对Smad3、ATF3活化以及Nrf2入核的影响;并在293FT细胞中通过蛋白质免疫共沉淀（Co-IP）验证芒柄花素对外源性Smad3与ATF3结合的影响,评估其对ATF3下游转录因子SLC7A11表达水平的影响。结果:动物体内实验表明:1.小鼠的血清肌酐、尿素氮水平在FA模型组中的含量明显比在正常组血清中检测到的高,而FN干预处理显著降低了这一水平。2.HE染色显示在FA和UUO模型中受损的肾小管管腔损伤在FN干预处理后得到明显改善。3.Masson染色以及纤维化基因ɑ-SMA,fibronectin,Col1a1的IHC染色,PCR检测和Western blot实验表明,沉积在肾组织间质的胶原纤维以及纤维蛋白的表达在FN灌胃组明显降低,且FN的效果优于VST。4.FN降低了4-HNE的表达以及促进了Nrf2的入核。5.FN逆转了在FA和UUO模型中升高的组织铁水平,MDA水平和降低的GSH水平以及铁死亡负相关蛋白GPX4和SLC7A11的表达。6.在FA和UUO模型中被激活的Smad3以及表达量明显增多的活化形式的p-Smad3和ATF3水平,在FN处理组显著降低。细胞体外实验结果显示:1.FN处理p TECs的适宜浓度是0-80μM,超过80μM FN对细胞表现出明显的抑制作用。2.通过Western blot检测发现纤维化蛋白的表达在RSL3/erastin的刺激下表达增多,FN干预后其含量显著降低。3.氧化应激生物标志物4-HNE和铁死亡的负相关蛋白GPX4和SLC7A11与体内实验呈现一致的表达变化。在铁死亡环境中升高的MDA水平和脂质过氧化程度以及降低的GSH水平和细胞内铁含量在FN处理后被逆转。4.在铁死亡微环境中,FN促进了Nrf2的入核。5.Smad3和ATF3在铁死亡刺激下从细胞质易位到细胞核,在FN干预后易位现象得到明显抑制。6.FN干预阻断了Smad3与ATF3的结合。结论:1.FN可改善叶酸小鼠肾功能损伤,修复肾小管损伤。2.FN在体内和体外对肾脏纤维化水平和铁死亡水平都有很好的抑制作用。3.FN通过阻断Smad3与ATF3的结合及促进SLC7A11的表达减轻p TECs铁死亡从而抑制纤维化来缓解CKD。总之,FN可以通过Smad3/ATF3/SLC7A11信号通路抑制铁死亡降低RF水平延缓CKD进程,可作为CKD的候选治疗药物。
其他文献
提升高校思想政治理论课的教学效果是高校和思政工作者不懈追求的目标。对于研究生阶段影响思想政治教学效果的因素，本文以文献研究法为理论基础，同时结合问卷调查法和统计分析法等方式展开调研，以寻找影响教学效果的主要因子，同时探索适应发展研究生阶段思政理论课的新教学模式与措施，以提升思想政治理论课教学效果和高校人才培养质量。
研究背景:继发性甲状旁腺功能亢进症（Secondary hyperparathyroidism,SHPT）是慢性肾脏病（Chronic kidney disease,CKD）常见远期并发症。SHPT可导致多个脏器功能损伤,其中最主要的临床表现是患者骨代谢异常后伴发肾性骨营养不良,临床又常称之为肾性骨病,患者可表现为骨折、骨骼及肌肉疼痛以及骨组织缺血性坏死,更严重者可出现退缩人综合征（身高缩短）及S
目的:比较药物涂层球囊与药物洗脱支架在冠心病合并慢性肾脏病1-4期非透析患者中的疗效及安全性以及对冠心病患者介入术后的危险因素分析。方法:选取2020年01月至2021年12月在广西壮族自治区人民医院心血管内科择期行冠状动脉造影+介入术的2939例患者,根据纳排标准最终纳入患者553例进行回顾性分析。根据肌酐清除率将其分为慢性肾脏病组与非慢性肾脏病组,各组再根据选用的介入方法将其分成药物球囊组与药
本文分析了全球23个MGEX测站在不同时期接收到的BDS-3的卫星数量变化情况，对不同时期的MGEX测站BDS-3数据进行精密单点定位解算，对比分析了BDS-3卫星数目变化对精密单点定位精度与收敛时间的影响。结果表明：（1）相较于2021年DOY 1,2022年DOY 1全球23个MGEX测站接收到的BDS-3卫星平均数由6.2颗增加到11.1颗。（2）地面测站接收到更多的BDS-3卫星后，静态P
目的:RAAS抑制剂等常规疗法不能有效改善糖尿病肾脏病（Diabetic kidney disease,DKD）患者的预后,四川地区血尿酸水平高于全国人群,代谢综合征（Metabolic syndrome,MS）诊断有自身特点,而常规疗法联合钠葡萄糖共转运蛋白2抑制剂（SGLT-2i）对四川地区DKD合并MS患者的eGFR斜率、肾脏终点事件及血糖、血脂、血尿酸的影响未见报道。本研究通过长期随访四川
研究背景:血管病理性钙化主要发生在慢性肾脏病（CKD）患者人群中,是心血管疾病的主要原因。血管钙化与骨生成过程类似。多年来,研究揭示了血管钙化的各种机制,如血管平滑肌细胞（VSMCs）的成骨样分化、凋亡、氧化应激、内质网应激、钙磷代谢紊乱和促钙化因子与抑钙化因子间失衡等,目前尚缺乏任何有效的钙化预防措施。五羟色胺（5-HT）是一种生物胺,CKD患者5-HT水平较高,5-HT可促进骨细胞分化来促进骨
目前，针对农田重金属污染问题，人们已经提出了许多解决策略，以保证农田的安全耕作。土壤修复的目的是在重金属污染的农田中生产安全的粮食作物，而不是有目的地去除多余的金属。为深入探究重金属污染农田的修复技术，本研究基于土壤生态修复的相关原理，以贵州省毕节市农田土壤为研究对象，测量了121个农田采样点位土壤中的11种重金属元素含量，其中Pb、Zn、Cd这三种元素变异系数超过了100%;Ni、Co、Mn、C
＜正＞随着多频多模GNSS的快速发展，包括中国自主研制的北斗卫星导航系统（BDS），已广泛应用于大地测量、环境监测和灾害预警等相关领域。人们对于实时高精度GNSS导航定位需求日益增强，这给GNSS数据处理及应用带来了新的机遇与挑战。论文围绕BDS/GNSS精密单点定位（PPP）模型算法及其相关应用展开研究，主要研究内容和创新工作包括：（1）提出了多种多频多系统PPP模型，评估了BDS单频、双频、三
目的:复发缓解型多发性硬化（Relapsing-remitting multiple sclerosis,RRMS）是一种缓慢进行性疾病,随着病程发展,RRMS患者认知障碍及残疾进展可早期发生并进行性加重,故早期发现与诊疗尤为重要。本研究以定量磁化率成像（quantitative susceptibility mapping,QSM）为基础,选取丘脑、缓慢扩大病变（slowly expanding
在经济社会快速发展的时代背景下,中国的教育质量得到了明显的提升,多样化的教学模式和教育技术工具也不断涌现。随着数字化教育的快速发展,智慧教育已经步入新的发展阶段,为中国的现代化教育带来了深刻变革,并成为中国未来教育发展的整体趋势。本文旨在概述智慧教育的基本内涵,全面分析智慧教育的推行与实施现状,并进行科学研究,探索新时代教育背景下智慧教育的新模式。