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目的:探讨乳腺癌细胞系MCF-7及T47D中CD44+CD24-/low亚群细胞比例、细胞周期分布特点及增殖性;CD44+CD24-/low是否为乳腺癌干细胞特异性标记;探讨化疗对乳腺癌中CD44+CD24-/low亚群的影响。方法:1.选择人乳腺癌细胞系MCF-7及T47D作为研究对象,进行CD44及CD24标记,经流式分选技术分选出CD44+CD24-/low亚群及非CD44+CD24-/low亚群含量,分别测定其细胞周期;运用BrdU流式技术,测定乳腺癌细胞系中BrdU含量及CD44+CD24-/low亚群细胞中BrdU含量,同时检测BrdU标记的细胞成份。2.运用CD44,CD24标记人肺腺癌细胞系LTEP-A2、卵巢癌细胞系SKVO3及人成纤维肉瘤细胞系HT1080,流式细胞技术分选CD44+CD24-/low细胞亚群,并测定其细胞周期。3.选取原代乳腺癌标本,对术前未行化疗的人群及术前行新辅助化疗人群,分别用流式细胞技术检测CD44+CD24-/low亚群细胞的含量。结果:1.成功从乳腺癌细胞系MCF-7及T47D中经流式细胞技术测定并分选出CD44+CD24-/low亚群细胞与非CD44+CD24-/low亚群细胞,分别将两群细胞进行细胞周期分析后发现CD44+CD24-/low亚群细胞中G0/G1期细胞比例高于非CD44+CD24-/low亚群(P=0.005),S期细胞比例低于非CD44+CD24-/low亚群(P<0.05);2.运用流式细胞技术对MCF-7及T47D细胞系中BrdU标记的细胞进行检测,检测结果发现MCF-7中CD44+CD24-/low群细胞中BrdU的阳性率为24.2±7.3(%);在T47D中CD44+CD24-/low亚群细胞中BrdU的阳性率为13.7±4.2(%),而整个细胞系中BrdU阳性标记的细胞均为CD44+CD24-/low表型。3.人肺腺癌细胞系LTEP-A2、卵巢癌细胞系SKVO3及人成纤维肉瘤细胞系HT1080中,均检测到CD44+CD24-/low细胞亚群,分别为:20.94±3.4%,92.4±3.7%和88.1±4.4%。4.通过对乳腺癌原代标本进行检测发现,化疗组CD44+CD24-/low亚群细胞比例明显高于非化疗组(P<0.05)对“肿瘤减小比例”及“CD44+CD24-/LOW细胞含量”这两组变量运用spss进行二元变量相关性分析,结果Pearson相关系数为0.881,P=0.004,认为“肿瘤减小比例”与“CD44+CD24-/LOW”细胞含量之间成强正线性相关。结论:1、乳腺癌细胞系MCF-7及T47D存在CD44+CD24-/low亚群细胞,且细胞系中CD44+CD24-/low亚群细胞含量明显高于原代肿瘤。细胞系中CD44+CD24-/low亚群细胞与非CD44+CD24-/low亚群细胞细胞周期分析结果表明CD44+CD24-/low亚群细胞与非CD44+CD24-/low亚群细群相比,存在休眠期的细胞更多,而进入细胞周期S期的细胞比例少;对增殖性研究说明CD44+CD24-/low亚群细胞中有部分细胞具有增殖活性,而在整个细胞系中具有增殖性的细胞也为CD44+CD24-/low亚群细胞。2、在非乳腺癌细胞系中也可检测到CD44+CD24-/low亚群细胞,因此,我们认为CD44+CD24-/low可能不是乳腺癌干性细胞的特异性标记,但此亚群细胞多处于G0/G1期,在细胞周期分布方面符合肿瘤干细胞的特点。3、化疗虽然使肿瘤体积减小但使CD44+CD24-/low亚群细胞比例增高,可以认为化疗只能杀死非CD44+CD24-/low亚群的肿瘤细胞而对CD44+CD24-/low亚群细胞富集杀伤力小,这可能是肿瘤复发和多重耐药的根源,这为肿瘤耐药性及复发的研究提供了靶点。