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WIF-1是Wnt分泌蛋白的胞外抑制剂,Wnt信号通路在个体发育中起着重要的作用。为了深入研究WIF-1在神经系统发育中的作用,检测了Wif1在小鼠中枢神经系统发育中的表达情况。发现Wif1在中枢神经系统的表达从E11开始,一直持续到成年。在胚胎期,Wif1在大脑皮质、间脑、中脑和脊髓均有表达,其中大脑皮质、间脑和中脑表达丰富,在海马和间脑的表达水平最高。出生后,Wif1在中枢神经系统的表达水平下降,至成年时,Wif1主要表达在嗅球的僧帽细胞层和上丘脑的内侧缰核。结果显示,Wif1在胚胎期小鼠中枢神经系统表达强烈,提示在胚胎期神经系统发育中,Wif1可能对Wnt信号通路活性起着时空特异性的调节作用。E12.5时Wif1在端脑皮质的表达达到高峰,随后其在皮质的表达逐渐减弱。在E12.5-E14.5期间,Wnt信号分子在端脑发育的信号中心corticalhem(CH)表达强烈,作为Wnt的抑制因子,Wif1在信号中枢corticalhem内不表达,但在其两侧均有强烈的表达。
通过子宫内电击的方法,选择E12.5端脑侧壁表达相应的siRNA以下调Wif1的表达,在E12.5-E14.5期间将Wif1异位表达至CH区,观察端脑模式形成可能发生的变化。预实验的结果显示,电击pCAGIG-Wif1质粒后EGFP和Wif1mRNA均可表达在预定的靶向位置,为利用该技术进一步研究Wif1在端脑发育中的功能奠定了基础。