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目的:在超长宽比例的任意皮瓣的三面切口缘安装VSD负压封闭引流装置,间歇给予负压抽吸。通过观察皮瓣的大体形态、皮瓣存活率及病理切片HE染色的变化及差异,探讨VSD负压封闭引流促进任意皮瓣存活的可能性及其相关的机制。 方法:1、实验动物:新西兰长耳白兔健康清洁级12只,雌雄各半,体重质量2.5-3千克。 2、动物模型建立:于皮瓣模型制作前一天,各组白兔行5%硫化钠背部脱毛,脱毛面积从两侧髂前上棘向上至平腋窝水平,两侧脱毛至腋中线范围内,温水冲洗自然晾干后用纱布垫及弹力网套包扎好,以保温并防止背部皮肤与笼网挫伤。以1%戊巴比妥钠3ml/公斤体重静脉内注射进行麻醉,根据麻醉情况可于1小时后再次追加1ml/公斤剂量药液维持麻醉。麻醉成功后,取俯卧位,将其四肢捆绑于兔台上,0.5%碘伏消毒术区,于背部脊柱两侧设计长宽比例为10cm×2.5cm的皮瓣。按术前设计线掀起皮瓣后,随机选取一侧为实验瓣,另一侧为对照瓣。对照瓣与实验瓣固定在基底相同位置后采取皮下连续缝合的方法原位缝合,在实验瓣的切口缘切取适量的组织,使皮瓣与周围正常皮肤存在一定的间隙,将事先设计好的VSD海绵敷料贴附在切口缘,连接负压。 3、实验分组:本实验为自身对照实验,每只兔子背部脊柱两侧各切取一块皮瓣。随机分为实验瓣和对照瓣。在实验组皮瓣的三面切口缘安装VSD负压吸引装置,间歇给予负压抽吸(抽吸四分钟,间歇一分钟)。对照组皮瓣切取后原位缝合纱布包扎。12只白兔共24块皮瓣,每个组内实验瓣和对照瓣各12块。 4、取材:两组动物共计取材皮瓣24个,取材选择于术后4d时间点,在对照组皮瓣的坏死区与未坏死区交界处取材,在实验组皮瓣相同位置取材。 5、检测指标: (1)大体观察:在术后规定时间点将敷料及负压封闭引流装置拆除后观察皮瓣颜色、肿胀程度、毛细血管充盈试验、皮瓣有无感染及皮瓣坏死变化情况,并做记录、拍照,比较每个时间点对照侧与实验侧皮瓣的大体差异。 (2)计算皮瓣成活率:皮瓣存活率=皮瓣存活面积/皮瓣总面积×100%。通过数码相机拍摄创面照片,图像输入计算机,应用Image.Pro Plus6.0图像分析系统,计算皮瓣存活率。比较对照侧和实验侧皮瓣成活面积有无统计学差异,以分析负压封闭引流对皮瓣存活的影响。 (3)常规病理检查:10%福尔马林溶液固定的皮瓣标本组织经过常规脱水、透明、浸蜡、包埋,常规5um切片、展片进行HE染色。观察炎性细胞浸润情况,组织、细胞水肿、血管内皮细胞损伤及微血栓形成情况。 结果: 1、大体观察结果: 本例实验中对照组、实验组各12块皮瓣。其中对照侧皮瓣均有远端不同程度的坏死,呈现黑褐色干痴,质地硬,皮温低,间生带皮肤红肿,皮瓣边缘与创缘完全愈合。实验侧皮瓣基本存活良好,颜色红润,皮温正常,毛细血管充盈时间正常,周围组织无淤血、水肿。 2、皮瓣存活率结果: 实验组皮瓣基本全部存活,对照组皮瓣远端有不同程度的坏死。实验组皮瓣存活率与对照组皮瓣存活率的数据采用配对t检验,P<0.001,有统计学差异。 3、病理切片结果: 4天时皮瓣对照侧有典型的肉芽组织,可见明显炎性细胞浸润,可见核分裂象多见的成纤维细胞,未发现新生血管样结构。而实验侧典型的肉芽组织生长更多更明显,少量炎性细胞浸润,毛细血管多见,毛细血管扩张,管腔内可见红细胞充盈,有完整的基底膜,新增血管以薄壁血管为主,单层血管内皮细胞围成空腔状结构。毛细血管网与成纤维细胞向创面垂直生长得更加明显。成纤维细胞生长明显。 结论: 1、负压封闭引流技术能促进皮瓣成活。 2、负压封闭引流技术促进皮瓣微血管密度增大,促进血管新生。 3、负压封闭引流技术能够改善皮瓣淤血水肿。