选用花生品种丰花2号和鲁花11,从诱导芽丛成苗、确定筛选适宜浓度和探索侵染适宜菌液浓度及共培养时间3个方面进行提高农杆菌介导花生基因转化效率的研究。通过以上研究,优化了农杆菌介导花生基因转化的技术体系,将Bar基因和γ-维生素E甲基转移酶基因(γ-tmt)转入花生品种丰花2号中,获得转基因植株。对标记基因Bar、目的基因γ-tmt的PCR检测证明这两个基因已整合到花生基因组中。试验结果如下:1.适宜诱导芽丛成苗的培养基激素配比设置芽伸长培养基中激素BA浓度范围为0 mg/L ~30 mg/L,NAA浓度范围为0 mg/L ~5 mg/L,采用2因素5水平二次回归旋转通用组合设计,共13个处理。以胚小叶培养20d左右获得的芽丛为外植体接种于不同芽伸长培养基上,60d时调查各种培养基的芽丛正常分化率和成苗率,结果表明,培养基MSB+4.4 mg/L BA+0.7 mg/L NAA诱导芽丛成苗效果最好,正常分化率为27.33%,成苗率为62%。在上述试验的基础上,进步比较5种芽伸长培养基MSB+4.4 mg/L BA+0.7 mg/L NAA、MSB+5 mg/L BA、MSB+1 mg/L BA+2 mg/L IAA+0.5 mg/L KIN、MSB+1 mg/L BA+2 mg/L NAA+0.5 mg/L KIN和MSB诱导芽丛成苗的效果,60d时开盖调查,结果表明,培养基MSB+5 mg/L BA诱导芽丛成苗效果最好,正常分化率为42.61%,成苗率为153.87%。2.标记基因Bar和NptⅡ筛选剂筛选不同外植体的适宜浓度选用胚小叶培养12d获得的芽丛、成数种子去除子叶和胚根后获得的离体胚、离体胚培养2周后获得的组培苗、大田生长的未展开幼叶和展开叶5种材料,研究Bar基因筛选剂草丁磷(PPT,Phosphinothricin)和NptⅡ基因筛选剂卡那霉素(Kan,Kanamycin)、新霉素(Neo,Neomycin)、遗传霉素(G418,Geneticin)的适宜筛选浓度。结果表明,在培养基中附