手术和放化疗后复发的宫颈癌,具有临床进展迅速、预后差的特点,是宫颈癌患者死亡的主要原因。目前宫颈癌复发发病机制方面的研究还甚少。我们对82例接受了根治手术和术后放疗的宫颈癌患者(其中10例为复发患者)进行临床基因组学研究,以探究宫颈癌复发的基因组学改变。我们成功完成了 96例石蜡手术样本的全外显子组测序,得到了入组患者的体细胞突变图谱。突变频率最高的12 个肿瘤相关基因为 EP300,PIK3CA,FBXW7,PTEN,RB1,TP53,MSH2,STK11,MBD1,SMAD4,PIK3R1 和 ABI1。进一步分析发现 Cu13,KEAP1,TP53 和 RB1 的突变和宫颈癌复发高度相关,突变患者预后不良。我们还发现复发患者中FANCD2基因突变频率甚高(5/10),突变形式通常是基因组的缺失(4/10)。FANCD2蛋白是DNA损伤反应中的核心元件,在DNA交联损伤修复和范可尼贫血通路中发挥重要作用。FANCD2缺失的患者预后明显差于其他患者。为进一步研究FANCD2基因缺失在放化疗敏感性中的分子机制,我们在人胚胎肾上皮细胞HEK293T中利用CRISPR/Cas9技术敲除FANCD2基因。根据其蛋白功能结构域,设计针对2号、9/10号外显子的sgRNA,得到了 FANCD2缺失的细胞系,并用基因组PCR和测序手段证实敲除成功。综上,本研究发现FANCD2可能是与宫颈癌复发高度相关的诊断生物标记物和治疗靶点。