聚乳酸材料是具有良好生物相容性的合成生物可降解材料,对其表面进行改性,中和其降解产生的酸性物质,促进其与细胞之间的粘附,从而提高材料的生物相容性。在合成此类改性材料的基础上,本文采用体外原代成骨细胞培养法,直接将细胞接种在基质材料表面,对合成组织工程材料进行了细胞相容性研究。从细胞形态学、细胞附着与铺展、细胞增殖与周期和细胞生理功能几个方面比较了乙二胺改性聚乳酸(DMPLA)和RGD 改性聚乳酸(RGDPLA)与聚乳酸(PLA)对成骨细胞的影响,根据实验结果,分别对DMPLA 和RGDPLA 的生物相容性进行了综合评价,为临床应用提供理论依据,可望成为一种良好细胞相容性的组织工程材料。主要工作和结论如下: (1)细胞培养:采用组织块法从新生Wistar 大鼠颅骨中分离、培养成骨细胞;用von Kossa 改良法对培养的细胞进行鉴定。结果表明培养的原代成骨细胞具有成骨细胞的特征,可以用于材料上细胞相容性比较的实验研究。(2)细胞在基底材料上形态学分析:相差显微镜观察成骨细胞在基底材料上的生长情况,并照相记录。实验结果表明:RGDPLA 组的细胞密度高于DMPLA组和PLA,而且RGDPLA 组材料基底上的细胞形态呈三角形或短梭形,当培养至第5 天时大部分细胞已连接成网状,相对而言,DMPLA 和PLA 上生长的成骨细胞密度较小,表明成骨细胞在RGDPLA上的形态学表现优于在DMPLA和PLA的。就细胞形态学表现而言,RGDPLA 具有比DMPLA 和PLA 更好的成骨细胞相容性。(3)细胞在基底材料上分别复合培养4、8、12、16、20h 后对其表面细胞进行计数,定量比较细胞在不同基质材料上短时期的附着;采用HE 染色技术观察基底材料对成骨细胞铺展形态的影响。实验结果表明细胞在RGDPLA 上的早期附着在各时间点高于其他两组。正常铺展的成骨细胞呈方形梭形,并且有多指状伪足离心伸展。初期成骨细胞呈片状,低倍镜下显示呈圆形,边缘不规则。RGDPLA表面细胞铺展数量多,伸展完全,DMPLA 和PLA 表面细胞数量少,尚未完全铺展开。RGDPLA 有利于早期细胞的附着和铺展。(4)采用MTT 法测定成骨细胞接种在基质材料上后第2、4、6、8 天的细胞增殖存活能力,绘出生长曲线;通过流式细胞仪对与三种材料复合培养12、24、48h 细胞的细胞周期进行分析,发现成骨细胞的增殖能力及生长曲线因培养基底材料不同而不同。成骨细胞在三组材料上都具有增殖能力,其中,在RGDPLA 上的细胞活性显著大于在DMPLA 和PLA 上的,DMPLA 组的要显著大于在PLA 上的。