【摘 要】
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根据已知的霍乱弧菌埃尔托菌株O17的溶血素(简称hlyA)结构基因序列设计并合成一对引物,成功地从埃尔托型菌株7743的染色体上扩增出长度为2.23KDa的基因片段,把它与质粒载体pB
【出 处】
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中国预防医学科学院 中国疾病预防控制中心
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根据已知的霍乱弧菌埃尔托菌株O17的溶血素(简称hlyA)结构基因序列设计并合成一对引物,成功地从埃尔托型菌株7743的染色体上扩增出长度为2.23KDa的基因片段,把它与质粒载体pBV220连接,转化到受体大肠杆菌HB101中,得到268株克隆子.筛出三株具有溶血活性的阳性克隆子,命名为phlyA1,phlyA2,phlyA3.经PCR,酶切鉴定证实插入2.23KDa的基因片段.为了进一步研究零乱弧菌疫苗候选林7743中有几个溶血素基因.从埃尔托型零乱弧菌7743中PCR扩增出的两个溶血素结构基因及以建库方法从埃尔托型零乱弧菌7743中克隆的4.0KDa溶血素基因分别标记探针,利用探针杂交的方法研究埃尔托型霍弧菌7743中三种不同溶血素基因在O1群和O139群霍反菌中的分布情况,发现HlyA基因在霍乱弧菌中分布较广,结合PCR方法发现在O139零乱弧菌菌苗候选林XJ97002中也存在hlyA和hly1,为发现并消除O1群和O139群霍乱弧菌菌苗候选株残余毒力因子打下基础.
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