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目的观察大鼠脑挫伤后不同损伤时间段ICAM-1蛋白的表达,采用免疫组织化学方法(SABC)和免疫印迹法(Western Bloting)定性定量检测大鼠脑挫伤后ICAM-1表达,寻找ICAM-1蛋白表达与损伤时间变化的规律,为脑损伤时间推断提供新的方法。方法选取健康成年Wistar大鼠56只(雌雄不限),随机分成7组,对照组和脑挫伤后1h,6h,24h,48h,72h,7d组,每组8只。正常对照组动物经假手术处理后直接处死,实验组分别在大鼠脑损伤1h,6h,24h,72h,7d处死,常规消毒后打开头骨,取出挫伤区脑组织,称重80mg,-80℃液氮密封保存,用于免疫印迹检测提取蛋白。剩余脑组织用10℅的甲醛溶液中固定,用于HE染色和免疫组织化学染色。结果:(1)HE染色结果:HE染色结果:对照组脑组织细胞结构正常,细胞核核蓝染清晰,损伤组挫伤区可见脑组织间隙中聚集大量红细胞,蛛网膜下腔出血严重,神经元细胞肿胀,胞浆变空,核染色逐渐变淡,甚至消失,神经元坏死消失。(2)免疫组织化学染色伤后1 h即可观察到血管内皮细胞和胶质细胞内少量棕黄色反应物,挫伤24 h阳性表达物逐渐增多;72h后棕黄色反应物大量聚集,达到顶点,大鼠脑组织中几乎所有的神经细胞均有阳性反应物,一些淡染的神经元胞核内也有微量表达,随后棕黄色反应物逐渐减少,挫伤7 d后仍可观察少量棕黄色反应物,且明显多于对照组。(3)Western Bloting法结果:,经内参β-actin的校正,使用Image-.Pro Plus 6.0图像分析软件对ICAM-1免疫印迹条带进行分析,以IOD值作为相对含量,可见大损脑损伤1h可见ICAM-1蛋白微量表达,随着损伤时间的延长,ICAM-1的表达逐渐增多,到72h达到最高峰,其后ICAM-1表达降低,伤后7d仍有表达,且高于对照组水平。结论:大鼠脑挫伤后组织中ICAM-1的表达与损伤时间有一定关联,,两种方试验检测结果显示,ICAM-1蛋白的表达随着损伤时间的变化表现出一定的规律性,可望为脑损伤早期损伤时间推断提供新的敏感指标