黑龙江省是我国大豆的主产区,由于种植面积的不断扩大,使得大豆重迎茬面积不断增加,导致大豆根部病害发生严重,进而影响大豆产量。大豆根腐病是一种由多种病原真菌引起的土传病害,已经成为引起大豆减产甚至绝产的主要原因。目前国内外使用的化学农药虽然防治效果显著,但其中的化学成分不仅会污染环境,而且会通过在大豆体内的富集进而危害人体的健康。近年来,国内外学者相继展开了大豆根腐病生物防治方面的研究,但大多是侧重单一菌剂的研究,并且这些研究均是以单一菌剂对大豆根腐病菌拮抗作用作为出发点。因为大豆根腐病的发生与大豆根际土壤微生物群系的变化密切相关,所以,单一菌剂在实际应用时很难达到预期效果。因此,本研究以调节大豆根际微生物群系和维持大豆根际正常的微生态环境为切入点,开展防治大豆根腐病的复合生防菌剂的研究。本试验主要从菌株筛选、拮抗机理、大豆根际土壤微生物区系变化和生防菌定殖能力等方面进行研究,取得了如下结果:1.通过拮抗试验筛选出了复合生防菌剂组成菌,分别为哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis Cohn)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、恶臭假单孢菌(Pseudomonas putida)、荧光假单孢菌(Pseudomonas fluorescens)、粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)和粪链球菌(Streptococcus faecalis)。大豆,水稻,小麦和油菜种子的发芽试验结果表明,该复合生防菌剂对作物种子萌发有一定的促生作用。2.哈茨木霉(Trichoderma harzianum)和6株细菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis Cohn),巨大芽孢杆菌( Bacillus megaterium ),恶臭假单孢菌( Pseudomonas putida ),荧光假单孢菌(Pseudomonas fluorescens),粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens),粪链球菌(Streptococcus faecalis)均有产生几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶的能力,并且对大豆体内的脯氨酸含量、POD活性、PAL活性、PPO活性均有促进作用,其中哈茨木霉(Trichoderma harzianum)的促进作用最为明显。3.该复合菌剂可以有效的调节大豆根际土壤中细菌,真菌和放线菌三大菌群。研究结果表明,施用该复合生防菌剂能有效地降低大豆根际的镰刀菌属(Fusarium)和丝核菌属(Rhizoctonia)等有害真菌数量,并显著提高了大豆根际的根瘤菌(Rhizobium)和固氮菌(Azotobacter)的比例。这一研究结果表明该复合生防菌剂可以有效改善大豆根际微生态环境,降低根际有害菌数量,增加有益菌所占比例。4.通过对根际土壤中木霉孢子的检测可以表明,该复合生防菌剂中的木霉孢子在大豆根际的定殖能力较单一施用木霉孢子的定殖能力强。通过对大豆首片复叶期的株高,根长,干重,鲜重,ATP酶活力,根系活力等生理生化指标的测定表明,该复合生防菌剂对大豆的幼苗生长有一定的促进作用。